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应用合成致死原筛选胰腺癌对化疗药物反应的关键基因
中文摘要
目的 本研究的目的在于应用全基因组范围内合成致死筛选的方法寻找胰腺癌对
化疗药物耐药中的关键基因,以期为胰腺癌的诊断和治疗提供新的生物标记物、治
疗靶点和联合治疗方案。
方法通过分子克隆的途径构建以piggyBac转座子为基础的全基因组搜寻载体;
确定人胰腺癌细胞系(Panml)的特性;通过DNA转染和以荧光素酶为基础的报
告基因检测建立并筛选含有稳定四环素介导的基因调控系统的Panc-1细胞株;利
围那突变文库;并进一步进行了与吉西他滨合成致死的预筛选。
结果成功构建了以p,ggyBac转座子为基础的基因搜寻载体;筛选得到了2个具
781
细胞株;成功建立了Panc-1细胞全基因组范围内的随机基因突变文库,进一步将
进行吉西他滨合成致死的筛选。
结论成功构建了含有高度可调节性的四环素调控系统的人胰腺癌细胞系以及全
基因组范围内的随机突变文库。为在胰腺癌中进行化疗药物合成致死基因筛选提供
了有用平台。
‘●
关键词胰腺癌,耐药性,基因,筛选
6
Abstract
of
The this isto
Objevtivegoals studyapplygenome-widesyntheticlethality
forthe of
thecritical invokedin
screeningdiscovery genes therapeuticdrug
ofPancreatic
resistance to novel
canceEprovide
andnovelcombination forPancreaticcancer.
targets therapeutics
We
Methodsconstructed based
piggyBactransposongenome-widescreening
vectorsmolecular humanPancreaticcancercelIline
by cloning;charactedzed
stablePanc-1
celIIineswith
(Panc-1):generated gene
withDNAtransfectionandLuciferasebased
regulation reporterassayscreening;
established random librariesofPanc-1cells
genome-widemutagenesis bylarge
scale and mediated further
electroporationpiggyBac recombination;and
genetic
out of
carried
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