异丙酚对原代培大鼠海马神经元线粒体膜电位的影响.pdf

LtI尔人学颂十。学f带论文 异丙酚对原代培养大鼠海马神经元线粒体膜电位的影响 专业 麻醉学 研究生 张王可 导师 于灵芝 中文摘要 目的：本研究拟观察临床相关浓度的异丙酚对缺氧复氧损伤后大鼠海马神经元形态、 MTT及线粒体膜电位的变化，进一步探讨异丙酚对癌再灌注损伤的保护作用及机制。 从而指导临床合理用药，为异丙酚在临床上的进一步应用提供理论依据。 方法：1．孕17~18天的胎鼠海马神经元原代培养；2．实验分组：将培养67天的胎 鼠海马细胞分为正常对照组(C)，缺氧复氧模型(鹾)组和异丙酚(P)组；后两组分 T4，T5)。3．倒置相差显微镜下观察各组各时间点海马神经元结构的变化。4．采用淞T 法评价异丙酚对大鼠海马享孛经元存活率和线粒体功能的影响。5。以Rhl23势荧光探针 标记大鼠海马神经元线粒体，用流式细胞仪对线粒体膜电位(MMP)进行定量分析， 激光共聚焦显微镜对线粒体膜电位进行定性观察。 结果：l。琢代培养的大鼠海马神经元，形态活性良好。2．模型组神经元胞体内出现空 泡，轴突断裂，出现碎片。异丙酚组神经元轻微肿胀，个别神经元胞体内出现空泡， 受损伤细胞比例较模型组低。3．MTT法显示：在复氧卜12小时中的各时问点异丙酚 组维胞存活率均显著太子模型组(P0．05)，面在复氧24小时，模型组和舞丙酚组的 细胞存活率已无显著性差异。4．流式细胞仪检测结果显示：j下常培养组的平均荧光 强度值为353．84，缺氧2小时后两组的平均荧光强度值都有了明显下降，模型组为 山尔人学硕十学能论文 224。09，冥丙酚组为264。60。异丙酚组明显高于模型组。复氧4—2碡小时各时测点蘸 组海马神经元线粒体膜电位的平均荧光强度值均匀下降，但同一时问点的异丙酚组均 明显高于模型组。激光共聚焦显微镜扫描结果显示：模型组复氧各时间段的神经元， 随着时闻的延长，绿色荧光逐渐变暗，数量减少，红染细胞逐渐增多。尤其是复氧O 小时，和复氧24小时的图像变化最为明显。而在异丙酚组这种变化较为缓和。 结论：1．细胞凋亡线粒体膜电位的变化早在缺氧2h即出现变化，因而可作为细胞凋 亡的早麓检测指标。2．异丙酚能够增加海马神经元缺血髯灌注损伤过程中细胞的存活 率，改善线粒体功能。增强线粒体内膜上质子泵的转运功能，保持线粒体内外的膜电 位差的相对稳定。且其对神经细胞的保护作用具有明显的时间效应：单次用药后，随 时间的延长其保护作用逐渐减弱。 关键词：异丙酚缺氧复氧海马神经元凋亡线粒体膜电位 4 1lI乃：人。丫：硕}：。羊f市论文 The influenceof onthemitochondriamembrane propofolum of potentialhippocampusneurocytes ABSTRACT the andmechanismof tothecerebral objective：Toinvestigateprotection propofolum the of ischemia-reperfusioninjuries，by changesneurocyte observing mitochondriamembraneofrat’S thiazolyltetrazolium(MTT)and potential hippocampus after and hypoxiaresupplying