微囊化猪肝细胞基础的流化床式生物反应器的猪逆转录病毒传播风险研究.pdf

浙江大学硕士学位论文 中文摘要 微囊化猪肝细胞为基础的流化床式生物反应器的猪逆 转录病毒传播风险研究 浙江大学医学院传染病学 硕士研究生刘飞 导师 杨芊 摘要 背景：生物人工肝支持系统作为用来改善肝衰竭病人症状和帮助其过渡到肝 移植的治疗手段之一，因为主要的细胞源：原代猪肝细胞的应用，不得不面对猪 逆转录病毒的传播风险。在本实验室，以微囊化猪肝细胞为基础的流化床式生物 反应器已成功运用于肝衰竭实验猪的治疗，本实验通过检测此反应器的核心构件： 微囊化猪肝细胞的逆转录病毒传播风险，来评估此反应器的生物安全性。 方法：制备微囊化原代猪肝细胞并培养，收集6小时，12小时，24小时，72 小时的细胞培养上清，感染HEK，293细胞并传代，每周收集1次感染细胞，运用 检测病毒的载量。PK．15细胞作为阳性对照，hepG2细胞作为阴性对照。 结果：在微囊化原代猪肝细胞的培养上清及感染细胞中均可检测到猪逆转录 病毒基因，并且在微囊化细胞培养上清中，病毒载量随时间增长而增加。 结论：以微囊化猪肝细胞为基础的流化床式生物反应器有猪逆转录病毒病毒 传播风险。 关键词：微囊化原代猪肝细胞；生物反应器；猪逆转录病毒；逆转录．聚合酶 链反应 · Ⅱ 浙江大学硕士学位论文 英文摘要 Fluidized_bed assist bioartillicialliVer basedon microencapsulatedprimaryporcine risk haVeofPERVstransmission hepatocytes 7I’heflrsta硒liated of hospital，collegemedicine，zhejianguJliVersity State andtreatmentofinfectiousdiseases keylaborato巧ofdiagIlosis FeiLiu Postgraduate： AdVisor： QiallYang Abstract aSsist to liVer Background：bioanificialliVerdeVices(BLADs)isexpectedbridge failure toliVer patients trallsplalltation，but porcineendogenous still a iIl dsk andbioartificialliver posepotentialpig—to—h啪anxenotl砒lsplantation our bioanificialliveraLssist on lab，nuidized-bed therapy．In