新生大鼠胰腺干胞的分离、培养、初步鉴定及其疗效.pdf

。 中 文 摘 要 目的①成功分离、培养及初步鉴定新生大鼠胰腺干细胞o②建成可靠、稳定的1 型大鼠糖尿病模型，并将胰腺干细胞成功移植人大鼠体内，使其分泌胰岛素，降低血糖o ③为利用胰腺干细胞移植治疗糖尿病提供实验依据。方法①取SPF级新生大鼠的胰 腺组织，用完整胰腺胶原酶消化法分离胰岛o②以低糖DMEM为基础培养液，于不同时 态学特征及生长特性o③应用免疫细胞化学法对培养不同时期的细胞进行NeBdn及 成模的大鼠分为两组，实验组接受腹腔移植胰腺干细胞，移植细胞数约为2×106个，对 照组移植不含细胞的培养液。两组大鼠均于移植前48h测定空腹血糖，移植后每周测空 腹血糖1次。结果①新生大鼠胰腺内纤维组织少，体积小，完整胰腺胶原酶消化法简 化了胰岛分离步骤，减少了污染机会，有利于进一步培养o②在培养的24h可见细胞贴 壁，但贴壁细胞数量较少，改用无血清培养后，贴壁细胞快速长，10一15d形成单层细胞 汇集，细胞形态较一致o③培养所得细胞一直较多表达胰腺干细胞的标志一Nesdn，随培 养时间延长，表达CK一19的细胞数量逐渐增多o④大鼠注射s吧7d后，大部分血糖值 达到成模标准。⑤实验组大鼠移植3周后血糖开始有不同程度下降，但未降至正常范 围口结论①新生大鼠胰腺消化后，获得的细胞于不同时期表达胰腺干细胞的标志一 模型o③胰腺干细胞经腹腔移植后，具有一定的抗大鼠糖尿病作用。 关键词胰腺干细胞移植糖尿病大鼠 。 9 of Isolation、cIntiVation、identincation pancreatic stem of ratsandtheir e脏ct celIs born neWIy therapeutic was to stem objective①ni8studydesignedisohte，cultivate粕didentif3rp卸cre“c ceusfrom ratmodelSwKchwe弛他liable bom眺7 Idiabetic newb p锄cre鹪．②Preparet)，pe 肌d we stemceUsint0出erat stemceU8cotlld8ecretein- steady，men rnodels，tlle impl锄ted sulinanddecre∞e tocurediabetes the眦7b100d苕uc∞e．③Pr0、rideexperimental删dence meUitus访t}l stem mtswastakenout paIlcreaticcells．Metl吣ds①胁epancre羽of舱onatal 0fint11esterile we mewhole obtajnisletswitll condition，tIlendigest p肌cre鹪t0 collagenase． media ceufact0璐 ceHsw鹊cul吣ed诚出DMEMoflower ②The