第三章 糖类药物新精要.ppt

一、糖类药物的生理活性 (1)调节免疫功能 (2)抗感染作用 如甲壳素 (3)促进细胞DNA、蛋白合成可促进细胞增殖和生长。 (4)抗辐射损伤作用 如茯苓多糖、紫菜多糖、透明质酸等 (5)抗凝血作用 如肝素、甲壳素、芦荟多糖、黑木耳多糖等均具有类似的抗凝血作用。 (6)降血脂、抗动脉粥样硬化作用 如硫酸软骨素 (7)其他作用 如：右旋糖酐可以代替血浆蛋白以维持血液渗透压 二、糖类药物的来源 糖种类繁多，广泛存在于动物、植物、微生物（细菌和真菌）、海藻中。 1. 动物糖类 动物糖类来源于动物结缔组织、细胞间质，是研究最多、临床应用最早、生产技术最成熟的糖类，重要的有肝素、透明质酸和硫酸软骨素等。 2. 植物糖类 植物糖类来源于植物的各种组织，从各种中草药中都可以提取分离出药用糖类。 3. 微生物糖类 依生物来源分为细菌多糖、真菌多糖和藻类多糖 按分泌类型又分为胞内多糖和胞外多糖。如香菇多糖、云芝多糖。 三、糖类药物的理化性质 游离单糖及小分子寡糖易溶于冷水及温乙醇，可以用水或在中性条件下以50％乙醇为提取溶剂，也可以用80％乙醇，在70～78℃下回流提取。溶剂用量一般为材料的20倍，需多次提取。 植物体内含有水解多糖及其衍生物的酶，必须抑制或破坏酶的作用后，才能制取天然形式存在的多糖。供提取多糖的材料必须新鲜或及时干燥保存，不宜久受高温，以免破坏其原有形式，或使多糖受到内源酶的作用而分解。速冻冷藏是保存提取多糖材料的有效方法。 提取方法依照不同种类的多糖的溶解性质而定。 昆布多糖、果聚糖、糖原易溶于水 壳多糖与纤维素溶于浓酸 直链淀粉易溶于稀碱 酸性黏多糖常含有氨基己糖、己糖醛酸以及硫酸基等多种结构成分，且常与蛋白质结合在一起，提取分离时，通常先用蛋白酶或浓碱、浓中性盐解离蛋白质与糖的结合键后，用水提取，再将水提取液减压浓缩，以乙醇或十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)沉淀酸性多糖，最后用离子交换色谱法进一步纯化。 三、糖类药物的分离纯化 1.单糖、低聚糖及其衍生物的分离纯化 一般提取流程：粉碎植物材料，乙醚或石油醚脱脂，拌加碳酸钙，以50%乙醇温浸，浸液合并，于40～45℃减压浓缩至适当体积 用中性醋酸铅去杂蛋白及其他杂质，铅离子可通H2S除去，再浓缩至黏稠状 以甲醇或乙醇温浸，去不溶物(如无机盐或残留蛋白质等) 醇液经活性炭脱色，浓缩，冷却，滴加乙醚，或置于硫酸干燥器中旋转，析出结晶 单糖或小分子寡糖也可以在提取后，用吸附层析法或离子交换法进行纯化。 2.多糖的分离与纯化 多糖药物的原料来源和性质各不相同，因此常选用不同的分离方法。常规的分离法包括提取、除脂、脱色、除蛋白、醇沉淀、柱分离纯化、透析等基本步骤。 许多植物的种子或动物样品中需去脂溶性杂质； 用85%乙醇可除去单糖、低聚糖等干扰成分； 含色素较高的植物根、茎、叶、果实等需先进行脱色处理。 （1）多糖的提取 提取多糖时，一般需先进行脱脂，以便多糖释放。方法：将植物材料粉碎，用甲醇或乙醇一乙醚(1︰1)混合液，加热搅拌温浸1～3h，也可用石油醚脱脂。动物材料可用丙酮脱脂、脱水处理。 ①热水提取 适用于难溶于冷水和乙醇，易溶于热水的多糖。提取时材料先用冷水浸泡，再用热水(80～90 ℃)搅拌提取，提取液除蛋白质，离心，得清液。透析或用离子交换树脂脱盐后，用乙醇沉淀的多糖。 ②稀碱液提取 主要用于难溶于冷水、热水、可溶于稀碱的多糖。此类多糖主要是一些胶类。如木聚糖、半乳聚糖等，提取时可先用冷水浸润材料，使其溶胀后，再用0.5 mol/LNaOH提取，提取液用盐酸中和、浓缩后，加乙醇沉淀多糖。如在稀碱中不易溶出者，可加入硼砂，如甘露醇聚糖、半乳聚糖等能形成硼酸配合物，用此法可得到相当纯的产品。 ③黏多糖的提取 大多数黏多糖可用水或盐溶液直接提取，但因大部分黏多糖与蛋白质结合于细胞中，需用酶解法或碱解法裂解糖一蛋白间的结合键，促使多糖释放。 （2）多糖的纯化 ①乙醇沉淀法 乙醇沉淀法是制备黏多糖的最常用手段。乙醇的加入，改变了溶液极性，导致糖溶解度下降。 一般只要黏多糖浓度不太低，并有足够的盐存在，加入4～5倍乙醇后，黏多糖可完全沉淀。可以使用多次乙醇沉淀法使多糖脱盐，也可以用超滤法或分子筛法(Sephadx G-10或G-15)进行多糖脱盐。加完酒精，搅拌数小时，以保证多糖完全