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5体外受和早期胚胎培养资料.ppt
试管动物技术 是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育成早期胚胎后,再经移植产生后代的技术。 阅读P70、71思考以下问题: a.精子的采集有哪些方法? b.体外受精需要哪些前处理? §3.2体外受精和早期胚胎培养 1992年我国首例三胞胎试管婴儿 根据资料回答下列问题: 1.试管婴儿技术包括哪些操作步骤? (体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植) 2.试管婴儿培育和母亲正常怀孕的过程有何异同? 相同之处:都通过有性生殖产生;都要在母体子宫内发育形成胎儿。 不同之处:受精作用在体外,并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植。 一、从试管牛说起 牛的生育率虽然很低,但是牛的卵母细胞却相当的多,其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右 公牛产生的精子数目就更多了 伟大设想诞生了 如果能分别采集牛的精子和卵母细胞,让它们在体外完成受精并且发育成一个个小胚胎,再将这些胚胎移植到一个个本地牛体内“借腹怀胎”,就可实现良种牛的快速大量繁殖 试管动物技术 精子 卵子 受精卵 早期胚胎 移植 子宫 个体 试管动物技术过程: 第一步:体外受精 第二步:胚胎的早期培养 第三步:胚胎移植 快速繁殖动物优良品种 目的: 试管动物技术 首先要做 主要包括 、 和 等几个主要步骤 。 概念:采取雌性动物的 和雄性动物的 ,使其在 受精。 二、体外受精 卵母细胞 精子 体外 卵母细胞的采集 精子的获取 受精 a.如何使雌性动物排出更多的卵子? b.对实验动物小鼠、兔和小家畜猪、羊如何采集卵子? c.对于大家畜或大型动物如何采集卵子? d.采集的卵子是否马上可以受精? 阅读P69、70思考以下问题: 1.卵母细胞的采集和培养 采用的主要方法是给供体注射 ,使其排出更多的卵子,之后从 中冲取卵子,直接与获能的精子在体外受精。 促性腺激素 输卵管 a.如何使雌性动物排出更多的卵子? 超数排卵处理 b.对实验动物小鼠、兔和小家畜猪、羊如何采集卵子? 对不同动物,采集卵母细胞的方法不同。 1.卵母细胞的采集和培养 大家畜或大型动物,如牛,卵细胞的采集: 从屠宰场已屠宰母畜的 中采集卵母细胞,也可以借助 、 或 等工具,直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。 卵巢 超声波探测仪 内窥镜 腹腔镜 1.卵母细胞的采集和培养 c.对于大家畜或大型动物如何采集卵子? d.采集的卵子是否马上可以受精? 采集的卵母细胞,都要在体外经 后,才能与 精子结合完成受精。 人工培养成熟 获能 2、精子细胞的采集和获能 2、精子细胞的采集和获能 (1)采集方法: 假阴道法 手握法 电刺激法 a.精子的采集有哪些方法? 大家畜或大型动物 猪、犬等体型较小,易于控制的动物 野生或经济动物 此外,啮齿类实验动物可在处死后从附睾尾收集精液。 2、精子细胞的采集和获能 (2)体外精子获能的方法: 培养法: 化学诱导法: 如:啮齿动物、家兔和猪等 如:牛、羊等 放入人工配制的获能液中 放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中 b.体外受精需要哪些前处理? 3.受精 获能溶液 专用受精溶液 获能的精子和培养成熟的卵子,一般情况下在 或 中完成受精过程。 CO2培养箱 三、胚胎的早期培养 复习:动物细胞培养的条件是什么P46 糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血清等 动物细胞培养液成分? 精子和卵子在体外受精后,应将受精卵移入发育培养液中继续培养,以检查受精状况和受精卵的发育能力。 培养液成分: 有机盐、无机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等 三、胚胎的早期培养 动物胚胎培养液成分与动物细胞培养液成分比较 特有物质 调节物质 营养物质 盐类 动物细胞培养液 动物胚胎培养液 项目 无机盐和有机盐 氨基酸、核苷酸 维生素、激素 血清 无机盐、微量元素 促生长因子 糖、氨基酸 血清、血浆 三、胚胎的早期培养 培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植或冷动保存 三、胚胎的早期培养 不同动物胚胎移植时间不同 牛、羊: 小鼠、家兔: 试管婴儿: 桑椹胚或囊胚阶段 可在更早的阶段移植 8~16个细胞阶段 注:胚胎发育的主要场所是母体 存放条件? 采集良种母牛的卵母细胞
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