第二章DNA复制精要.ppt

第二章 DNA 的复制 问 题 1、原核生物和真核生物DNA的复制会一样吗？ 2、DNA复制时是两条链都做模板吗？如果是的 话如何解决两条链的方向问题？ 3、DNA链为什么不选择3’---5’的方向延伸呢？ 4、DNA复制都需要那些酶？他们是如何起作用 的？ 5、线性DNA复制的5’末端隐缩问题是如何解决的 6、DNA的复制是如何保证其准确性的？意义何 在？ 本章内容 第一节 DNA的半保留复制 第二节 复制原点、方向、和方式 第三节 DNA复制的酶学 第四节 DNA的半不连续复制 第五节 真核生物DNA的复制 第六节 DNA复制的错误校对 单独复制的DNA单元称为复制子（Replicon ），原核 细胞的复制子就是细菌染色体本身，每个真核细胞染色 体都包含有大量的复制子。 DNA的半保留复制的证明 1958 年Meselson-Stahl experiment using 15N (the Heavy isotope) and 14N (the Light isotope) to grow E. coli cells 证明了DNA的复制是半保留复制 第二节 复制原点、方向、和方式 复制原点： （replication origins）一般用o或者ori表示，是DNA的复制起始位置。结构特点：DNA呼吸作用强烈的区段，富含AT Why 复制方向：从特定位置开始的双向或者单向 复制方式：复制叉式（θ复制） 滚环式复制 Replication fork is the point at which strands of parental duplex DNA are separated so that replication can proceed. Replicated DNA is seen as a replication eye flanked by nonreplicated DNA. 第三节 DNA复制的酶学 DNA 复制是核苷酸链的不断生长，那就需要将四种脱氧核苷三磷酸在酶的作用下通过磷酸二酯键连接在一起。 一、脱氧核苷三磷酸的来源（生物化学 ）： 二、酶 一 、脱氧核苷三磷酸前体的来源 废物利用：体内核酸降解或者直接来自培养基 新合成：（参考生物化学） 注意dTTP的合成，dUTP的渗入阻止 二、酶（一）、DNA聚合酶 1、一个能够在模板链上合成新的DNA链的酶叫做DNA聚合酶。原核和真核生物中都包含有多种DNA聚合酶的活动。只有它们中的一部分是真正参与了复制的；有时候把这些酶叫做DNA复制酶。 2、一个所有DNA聚合酶都具有的特点是：它们不能够从自由的核苷开始初始化DNA链的合成。它们需要一个引物提供一个自由的3’-OH端可以加入核苷。 3、原核生物的DNA聚合酶目前发现的主要有三种：分别是PolⅠ、PolⅡ和PolⅢ Only one DNA polymerase is the replicase. The others participate in repair of damaged DNA. DNA polymerase I DNA polymerase I 有四种主要的活性: 1、 Polymerase (DNA repair and RNA primer replace); 2、 3`→ 5` exonuclease (proofreading) ;3、 5`→ 3` exonuclease ( removing RNA primers and damaged DNA fragments) 4、 endonuclease （DNA repair ） DNA polymerase Ⅲ PolⅢ是DNA链延长的主要的聚合酶，是一个复杂的多亚基酶，它的活性主要有： 1、 Polymerase (DNA replication ); 2、 3`→ 5` exonuclease (proofreading) ;3、 5`→ 3` exonuclease ( damaged DNA fragments)  PolⅠ和PolⅢ活性比较 1、Polymerase ： PolⅠ主要是DN