第二章免疫分析法精要.ppt

免疫分析是指利用抗原与抗体之间高特异 性的反应（即免疫反应）实现对抗体、抗 原或相关物质进行检测的方法。 免疫分析实际上是一种特殊的试剂分析， 抗体成为分析试剂。 第一节 免疫学基础 一、 一、抗 原（Antigen，Ag） 定义：能够刺激机体产生免疫应答，并且能 与免疫应答产物(抗体或免疫效应细胞)特异 性结合的物质。 2、抗原性(antigenicity，又称免疫反应性)： ? 指抗原分子与免疫应答产物(抗体或免疫效应细胞) 发生特异性结合的性质。（与抗体特异结合反应） ? 具有免疫原性的物质必然有抗原性，反之则不一定 成立，如半抗原，它具有抗原性，但不具备免疫原 性。 完全抗原（complete antigen)： 具有免疫原性和抗原性的物质，如：蛋白质、 细菌、病毒等。 半抗原（hapten，又称不完全抗原incomplete antigen ）： 无免疫原性，只有抗原性的物质，多为分子量较 小的有机物，如：二硝基苯酚（DNP）。 只具有免疫反应性而不具免疫原性的物质。 半抗原（hapten）： 无免疫原性，有免疫反应性，单独半抗原， 多为小分子物质。 无免疫原性的解决方法：大分子载体与半抗 原结合，形成半抗原-载体复合物，半抗原 成为大分子上新的表位，诱导免疫反应，产生抗半抗原抗体。 载体（carrier）： 赋予半抗原以免疫原性的蛋白质。 半抗原 + 蛋白质 ? 完全抗原 ? 结合到大分子载体上以后，半抗原可以改变载体 原有的表位，也可以形成新的表位。 ? 半抗原在表位中是关键性的基团。抗原特异性的 研究多是通过半抗原－载体复合物来进行的。 （一） 抗原的免疫原性 免疫原性是抗原最重要的性质，一种抗原 能否成功地诱导宿主产生免疫应答取决于 三方面的因素： 抗原的性质 宿主的反应性 免疫方式 ? 抗原的免疫原性，首先决定于其自身的化 学特性； ? 但同一种抗原，对不同种动物或同种动物 不同个体间其免疫原性强弱，可表现很大差 异； ? 因此一种抗原的免疫原性是由其化学性质和 宿主因素决定的。 具有免疫原性的物质称为（免疫原） （immunogen） 1、免疫原性的化学基础 ? 许多天然物质可诱导免疫应答； ? 其中大分子蛋白质和多糖具有强免疫原性； ?小分子多肽也具有免疫原性。 蛋白质： A. 氨基酸组成 --- 含芳香族氨基酸 （特别是酪氨酸），免疫原性强。 B. 结构：环状，免疫原性强；直链，免疫原性弱。 多糖：具有免疫原性, 较蛋白质弱。 核酸：多无免疫原性。 2）分子量 ? 凡具有免疫原性的物质，其分子量都较大， 一般在1万以上，小于1万者呈弱免疫原性， 低于4000者一般不具有免疫原性； 许多小的免疫性原性分子可激发细胞免疫， 而不产生抗体。 ? 亦有大分子量物质，如明胶分子量可达10 万，但因其为直链氨基酸结构，易在体内 降解为低分子物质，所以呈弱免疫原性。 ? 可见免疫原性除与分子量有关外，还与 其化学结构相关。 ? 多肽类激素如胰岛素虽为小分子量(6000) 亦具有免疫原性。来自一种动物的胰岛 素，如长期用于另一种动物，亦能诱导免 疫应答产生抗体。 3）化学结构 ? 免疫原性的形成还要求分子的化学结构 复杂。 ? 直链结构的物质一般缺乏免疫原性; ? 多支链或带状结构的物质容易成为免疫原; ? 球形分子比线形分子的免疫原性强。 2、宿主因素 免疫原性物质进入机体后能否诱导产生免 疫应答，除上述化学基础外，尚受宿主因 素的影响，而且是重要的因素。 1）异物性 ? 异物即非已物质; ? 异物性是抗原的核心，与机体亲缘关系越 远，组织结构的差异越大，异物性越强。 2）宿主遗传性 同种动物不同品系及不同个体对同种抗原 产生不同强度的免疫应答。 3）免疫方式 包括抗原进入的途径、剂量、次数和间隔 时间以及免疫佐剂的使用等因素也可影响 免疫应答。 B、免疫佐剂（adjuvant )： 定义：先于抗原或同时与抗原混合注射机 体可增强抗原的免疫原性的物质。 应用：a. 弱免疫原性物质 b. 免疫原剂量不足 佐剂种类： ① 油性乳剂