分解纤的维素的微生物的分离.doc

专题2 课题3 分解纤维素的微生物的分离答案 一、基础知识 1．纤维素：是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是地球上含量最丰富的多 糖类物质。棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。有些微生物能分解利用纤维素，因为它们能够产生纤维素酶。 2．纤维素酶：是一种复合酶，一般包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。前两种酶能使纤维 素分解成纤维二糖，第三种酶能将纤维二糖分解成葡萄糖。 3．筛选纤维素分解菌的方法是刚果红染色法。该方法可以通过颜色反应直接筛选。 其原理是：刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 4．纤维素分解菌大多分布在的环境中，也可以将富含纤维素的物质埋在土壤中，经过30天左右，再从已腐烂的物质埋藏处筛选纤维素分解菌在将样品稀释涂布到的培养基上之前，可以用增加纤维索分解菌的浓度。培养时要在摇床上振荡培养常用的果红染色法有两种：一种是，再加入；另一种是经过刚果红鉴别培养基培养后，在产纤维素酶的菌落周围会出现。可以用单细胞挑取法挑取纤维素分解菌。液体发酵和固体发酵两种答案：(1)①缓冲液调的pH范围不对。多数细菌的最适宜pH在6.5～7.5之间，所以应将缓冲液分别调pH为6.0、6.5、7.0、7.5、8.0。②试管包扎成捆后没有做标记，这样就分不清培养基的不同。应该在每捆试管外贴上注明pH的标签。③培养基灭菌的方法不对。培养基应在100 kPa、121℃的高压蒸汽灭菌锅中灭菌15～20min。④培养温度和时间不对，细菌应在30℃～37℃条件下培养1～2天。⑤不应测培养基重量，应测微生物的数目或菌体的重量。 17．富集培养是微生物学中最强有力的技术手段之一。主要是指利用不同微生物的生命活动特点的不同，制定环境条件，使仅适应该条件的微生物旺盛生长，从而使其在群落中的数量大大增加，人们能够更容易地从自然界中分离到所需的特定微生物。富集条件可根据所需分离的微生物的特点，从物理、化学、生物及综合多个方面进行选择，如温度、pH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等许多方面。下图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。 (1)本实验所需培养基为_________，碳源为_________。 (2)实验原理是_________________________________________________________。 (3)①→③重复培养的目的是_____________________________________。 (4)⑤的菌落中大部分是降解_________的微生物。 (5)⑥为_________组，⑦为_________组，设置⑥的目的是_________。 (6)⑤→⑥采用_________法，接种到⑥的培养基中，在操作过程中为防止污染应注意的事项是__________________。 答案：(1)选择培养基　对羟基苯甲酸　(2)利用以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基，经富集培养，选择出能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物　(3)增大分解对羟基苯甲酸微生物的比例 (4)对羟基苯甲酸 (5)对照 实验　说明通过富集培养的确得到了欲分离的目标微生物　(6)单细胞挑取接种环在火焰上灼烧灭菌，烧红的接种环在空气中冷却，同时打开皿盖挑取菌落接种到试管中，并塞好棉塞，接种环在火焰上灼烧，杀灭残留物 18．请你设计实验来证明纤维素酶的作用。 答案：(1)取2支20mL的试管，分别放入1cm×6cm的滤纸条。 (2)分别加入pH为4.8、物质的量浓度为0.1 mol·L-1的醋酸——醋酸钠缓冲液10mL、11mL。 (3)在加入10mL缓冲液的试管中加入1mL纤维素酶。 (4)将2支试管固定在摇床上，振荡反应。 结果：加纤维素酶的试管中的滤纸条被分解，另一支的未分解。 结论：纤维素酶有分解纤维素的作用。 专题6 课题2 胡萝卜素的提取 考点突破 考点一 胡萝卜素的提取 【基础知识整合】 1．胡萝卜素性质：胡萝卜素是橘黄色结晶，化学性质比较稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂。 2．来源：一是从植物中提取；二是从大面积养殖的岩藻中提取；三是利用微生物的发酵生产。 3．胡萝卜素提取：根据胡萝卜素易溶于有机溶剂的特点，可以有机溶剂萃取的方法提取胡萝卜素。 4．胡萝卜素萃取剂应具备的特点：萃取胡萝卜素的有机溶剂应该具有较高的沸点，能够充分溶解胡萝卜素，并且不与水混溶。此外，还应该考虑萃取效率，对人的毒性，是否易燃，有机溶剂是否能从产品中完全除去，会不会影响产品质量等问题。 5．影响萃取的因素