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超高效液相色谱系统简介
发展背景 1 理论基础 2 仪器组成 3 实际应用及展望 4 20世纪90年代,高效液相色谱发展的目标应该是降低成本、走向更低的价格以获得更广泛的应用 实际上,高效液相色谱的技术没有到达极限,用户对HPLC有更高的要求 超高效液相色谱是用高效液相色谱的极限 作为自己的起点 UPLC(Ultra Performance Liquid Charomatography) UHPLC(Ultra High Performance Liquid Charomatography) UFLC(Ultra Fast Liquid Charomatography) ………… van Deemter方程简化形式: H=a(dp)+b/u+c(dp)2u 理论塔板高度(H)与流速(线速度;u)及填料颗粒度(dp)之间的关系,其中,a项代表了颗粒度和柱床填装的优良程度;b项代表了轴向扩散;而c项则代表了传质 由曲线可以看出: 颗粒度越小柱效越高 其次每个颗粒度尺寸有自己的最佳柱效的流速 最后,更小的颗粒度使最高柱效点向更高流速(线速度)方向移动,而且有更宽的线速度范围 因此,建立UPLC系统需要解决的主要问题: 1、提高色谱柱的性能; 2、高压溶剂输送单元(超过15,000psi,约103MPa); 3、高速检测器;优化流动池以解决高速检测及扩散问题; 4、完善的系统整体性设计。 输液泵压力: 6,000psi(42MPa)→15,000psi(103MPa) 色谱柱填料粒径: 5μm → 1.7μm 检测器流动池体积: 10μL→500nL 其他 BEH(Ethylene Bridge Hybrid) 应用 与传统的HPLC相比,UPLC的速度、灵敏度及分离度分别是HPLC的9倍、3倍及1.7倍。因此UPLC在代谢组学分析、天然产物的分析及其他一些生化领域有较多应用。 使用UPLC与质谱检测器连接,会对天然产物分析,特别是中药研究领域的发展是一个极大的促进。 HPLC 40min UPLC 10min 氨基酸分析 天然产物分析 展望 发展更小粒径填料 与质谱仪联用 痕量及复杂天然产物、代谢产物的分析 发展国产超高效液相色谱 * * * *
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