第2讲色谱分析法.ppt

DAD的三维谱 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 分析甜菜萃取液中痕量的含氯农药宜采用 （ ） (1) 热导池检测器 (2) 氢火焰离子化检测器 (3) 电子捕获检测器 (4) 火焰离子化检测器 (3) 标准偏差?与峰底宽度W之间关系 式为 ( ) (1)Wb＝2 (2)Wb＝4 (3)Wb＝（21/2）×2? (4)W＝（21/2／2）? (2) 在液相色谱中, 范氏方程中的哪一项对柱效能的影响可以忽略不计? ( ) (1) 涡流扩散项 (2) 分子扩散项 (3) 固定相传质阻力项 (4) 流动相中的传质阻力 (2) 在气相色谱分析中, 相邻两组分的分离度与下列哪些参数无关? ( ) (1)塔板高度 (2)塔板数 (3)固定相量 (4)检测器灵敏度 (4) 当进样量一定时, 测得某检测器的峰高在一定范围内与载气的流速呈正比, 而峰面积与流速无关, 这种检测器是 ( ) (1)质量型检测器 (2)浓度型检测器 (3)热导池检测器 (4)电子捕获检测器 (1) 色谱法按分离原理分类, 可分为______________ 、______________、 ______________和_____________。 ?吸附色谱 分配色谱 排阻色谱 离子交换色谱 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 正相色谱与反相色谱 在液液色谱中为了避免固定液的流失，对流动相的一个基本要求是流动相尽可能不与固定相互溶，而且流动相与固定相的极性差别越显著越好(正相:固亲水,流疏水)。 按照固定相与流动相的极性差别，可把液-液色谱法分为正相（normal phase; NP）与反相（reversed phase; RP）色谱法两类 ： 如果采用流动相的极性小于固定相的极性，称为正相色谱，它适用于极性化合物的分离。其流出顺序是极性小的先流出，极性大的后流出。 如果采用流动相的极性大于固定相的极性，称为反相色谱。它适用于非极性化合物的分离，其流出顺序与正相色谱恰好相反， 反相色谱法的名称也正是由此而得。 1、流动相（溶剂）对分离度的影响 溶剂系统对分离度的影响，可用分离方程式说明： 在HPLC中，?主要受溶剂种类的影响；在溶剂的组成确定后，k主要由溶剂的配比所左右。因为选择不同种类的溶剂，根据固定相与组分间的分子间作用力不同，选择性不同, 则有可能使两个被分离组分的分配系数不等，即?≠１，或者使? 增大。改变多元溶剂系统的配比，洗脱能力改变，k改变。由此可见,选择溶剂系统是以能获得较大的? 与适宜的k 值,而使k 与tR 合乎要求为目的。 2、流动相组成 流动相按组成不同可分为单组分和多组分； 按极性可分为极性、弱极性、非极性； 按使用方式有固定组成淋洗和梯度淋洗。 常用溶剂: 烷烃、四氯化碳、甲苯、乙酸乙酯、甲醇、乙腈、水。 采用二元或多元组合溶剂作为流动相可以灵活调节流动相的极性或增加选择性，以改进分离或调整出峰时间。 3、对流动相的要求 由于高效液相色谱中流动相是液体，它对组分有亲和力，并参与固定相对组分的竞争。因此，正确选择流动相直接影响组分的分离度。 对流动相溶剂的要求是： （1）对样品有适宜的溶解度，要求k在1～10范围内（可用范围）或2～5（最佳范围）。k值太小，不利于分离，k值太大，可能使样品在流动相中沉淀； （2）溶剂要与检测器匹配。 例如用紫外检测器时，不能选用截止波长大于检测波长的溶剂。 对于折光率检测器 要求选择与组分折光率有较大差别的溶剂作流动相，以达最高灵敏度。 溶剂的紫外截止波长：