塞来昔布对实验脉络膜新生血管TLR4、NF-κB、COX-2和VEGF表达影响的研究.pdf

中 英 研 第 第 讨论……………………………………………………………………40 小结……………………………………………………………………4l 参考文献………………………………………………………………42 结论……………………………………………………………………44 综述塞来昔布治疗年龄相关性黄斑变性引起的脉络膜新生血管的研 究进展 ……………………………………………………………45 致谢…………………………………………………………………………50 个人简历…………………………………………………………………51 中文摘要 塞来昔布对实验性脉络膜新生血管TLR4、NF。KB、 COX-2和VEGF表达影响的研究 摘 要 目的：脉络膜新生血管(ehoroidal 疾病有关，是引起视力障碍的重要原因之一。近期研究发现，眼部的炎症 反应和免疫活化在CNV的发生和发展中起着重要作用。 塞来昔布是一种常见的非甾体类消炎药，具有COX．2特异抑制的作 用。炎症刺激可诱导COX一2生成，从而导致炎性PG类物质的合成和聚 ．积，尤其是前列腺素，引起炎症反应。塞来昔布可通过抑制COX．2阻止 PG类物质的产生，达到抗炎、镇痛及退热作用。 制作用，从而了解CNV中炎症对新生血管的影响，进一步探讨CNV的 发病机制和治疗方法。 方法： l实验性脉络膜新生血管中TLR4、NF．rd3表达规律的研究 1．110只健康棕色挪威大鼠，随机分为空白对照组、激光组，激光组以波 长647am的氪激光(波长647nm，光斑直径100 lxm，功率120mW,曝光时间 0．05s)，以视盘为中心围绕视盘均匀光凝9个点，以见到有气泡产生提示 Bmch膜被击穿为准建立大鼠CNV模型。 况。 1．3两组大鼠分别于光凝后3、7、14、21、30d随机选取一只，处死动物， 摘除眼球取眼后段组织制作石蜡切片。常规HE染色及光镜观察CNV的形 彩色病理图文分析系统测定其染色的平均灰度值，观察这两个因子的表达 变化情况。 表达影响及其意义的研究 中文摘要 2．1BN大鼠15只，随机分为空白对照组、实验对照组、塞来昔布治疗组。 治疗组通过灌胃法给药(塞来昔布50mg／kg，一天两次)，1周后实验对照 组和治疗组均给予激光光凝(方法同1)建立大鼠CNV模型。各组大鼠分 别于光凝后第3、7、14、21、30d进行荧光素眼底血管造影。 2．2造影后6h待大鼠体内荧光素染料大部分被排出，处死动物，摘除一只 眼球(另一只眼球用做RT-PCR反应的标本)制作空白对照组球后段组织 切片及实验对照组和治疗组的“最大CNV膜”切片。常规HE染色及用免疫 采用HPIAS．1000型高清晰度彩色病理图文分析系统测定其染色的平均灰 度值。 2．3用上述留取的各组大鼠其中一只眼球进行逆转录聚合酶链反应，来检 测上述三组中脉络膜组织TRL4、NF．r,B、COX．2和VEGFmRNA变化。 结果： l实验性脉络膜新生血管中TLR4、NF．r,B表达规律的研究 1．1光凝后7 d，FFA光凝斑早期轻度荧光素渗漏，晚期渗漏明显，证实 CNV形成。 1．2光镜下可见，Bruch膜破裂，在光凝区周围有巨噬细胞浸润，RPE细 胞迁移和纤维母细胞增生等，在视网膜下可见完整的CNV管腔。 1．3免疫组化结果显示，空白对照组TLR4、NF．r．B在脉络膜中的表达比较 弱。在激光组中，TLR4、NF．1(B随时间的发展，表达呈先上升后下降的 趋势。它们均在光凝后3d明显增加，7d时达高峰。 表达影响及其意义的研究 峰，但治疗组CNV发生率明显低于实验对照组(Po．01)。 都有明显表达，都随时间的发展，表达先呈上升而后下降的趋势。TRL4、 NF．KB在光凝后3d明显增加，7 d明显表达增多，21 d时达高峰。光凝后CNV表达高峰期7d和21d时， 显降低，差异具有统计学意义(PO．01)。