新西兰兔与SD鼠EAE模型的比较及PG490在EAE中作用机制研究.pdf

新西兰兔与SD大鼠EAE模型的比较及PG490在EAE中作用机制研究 作用机制研究 研究生：谢富华 导师：高聪主任医师 广州医学院神经科学研究所广州医学院第二附属医院 广I、I,I市昌岗东路250号(510260) 中文摘要 多发性硬化(multiple 应性脑脊髓炎(experimentalallergic 组织病理学改变与多发性硬化极为相似，被公认为研究多发性硬化的经典模型。 EAE模型的制作方法很多，文献也报道了使用不同种属的动物的研究，但普遍是使用 不同品系的大鼠来研究。由于动物的种类和品系，免疫原的成份等因素不同，EAE模 型的发病率、病程、病情和病理改变程度等均有差异，故而使不同研究结果的可比 性受到影响。本研究制备了不同种属动物EAE模型并比较其各自的特点，以便为以后 研究Ms者根据各自的实验目的来选择合适的模型做参考及提供不同动物EAE模型的 制作方法。 独特的抗炎和免疫抑制的效果，不仅抑制细胞因子的增殖活化，还可以使活化的T淋 BSj活 巴细胞发生凋亡，阻止进一步增殖。它可选择性地作用于p65亚基而抑$lJNF—K 性。与其他药物不同，PG490不抑制活化的NF—KB与DNA的结合，而是在NF—KB与DNA 结合之后仍然可以抑制靶基因的转录，实验证明它通过抑$《p65的转录激活域而发挥 作用。刘浩等研究发现PG490可以降低培养状况下的Jurkat细胞中NF—KB的活力，并 的：观察PG490在EAE模型中的作用并探讨其作用机制。 新西兰兔与sD大鼠EAE模型的比较及PG490在EAE中作用机制研究 材料与方法： 1、新西兰兔和sD大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)模型的建立及鉴定 2、NF—K B选择性拮抗剂P6490的作用及其作用途径的相关研究：本部分实验随机 的EAE模型从发病时(即首次发病时)PG490(0．2mg／kg／d)腹腔注射治疗5天。 g ／d)腹腔注射治疗5天。对各实验组动物分别进行临床评分，病理观察和组织评分， 应用荧光免疫及免疫组织化学的方法观察各实验组动物脑组织中NF—K Bp65及COX一2 的表达，应用ELISA方法测定各实验组动物脑组织中NF_KBp65活性，trkA含量和 外周血清IFN—Y的含量。本实验所得数据采用t检验和单因素方差分析检验，p0．05 为有显著差异，p0．01为有非常显著差异。 结果： 明显高于新西兰兔的发表率(60％)和复发率(o％)；SD大鼠的发病更加符合多发性 硬化的发病过程，新西兰兔的头颅MRI的改变具有明显性；尽管这两种不同动物模 型组织病理改变基本相同，但它们两者之间组织评分相比较差异有显著性。 2、各实验组脑组织中NF—K K 鼠EAE模型脑组织中均可见NF-KBp65和COX一2的表达，以首次发病期明显，但阳 在复发期该指标表达无明显减少，干预前后相比较阳性细胞计数差异无显著性 (PO．05)。 3、各实验组脑组织中NF-K Bp65活性的测定：在首次发病过程中，P6490干预前， EAE模型脑组织中NF_K Bp65活性呈现明显的增强趋势，PG490干预后其活性减弱趋 势较明显，干预前后相比较差异有显著性(pO．05)；，在复发过程中，PG490干预前， 其活性增强趋势不明显，给予PG490干预后其活性减弱趋势也不明显，干预前后相 新西兰兔与SD大鼠EAE模型的比较及PG490在EAE中作用机制研究 比较差异无显著性(P0．05)。 4、各实验组外周血清中IFN—Y含量及脑组织中神经生长因子受体trkA含量测定： 趋势，trkA含量呈现降低趋势，但在复发过程中其含量呈升高