深低温冷冻时间同种异体气管移植免疫抑制作用的实验研究.pdf

f fIlfl l If FUlrlf I I fillI j ＼1 1597 80 目 录 中文摘要……………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………4 研究论文深低温冷冻时间对同种异体气管移植免疫抑制作用的实验 研究 前言……………………………………………………………………7月lJ舌………………………………………………………………．…．．’7 材料和方法……………………………………………………………7 结果……………………………………………………………………12 附图……………………………………………………………………14 附表……………………………………………………………………19 讨论……………………………………………………………………21 结论……………………………………………………………………27 参考文献………………………………………………_……………27 综述同种异体气管移植的实验研究……………………………………32 致{射…………………………………．………………………………．．46 个人简历……………………………………………………………………47 中文摘要 深低温冷冻时间对同种异体气管移植 免疫抑制作用的实验研究 摘 要 临床上多种原因可导致气管狭窄，切除病变气管行气管端端吻合术是 最理想的方法。但是气管长距离大范围缺损无法行端端吻合，就需要采用 气管重建的方法。气管移植被认为是气管重建的首选方法，但同种或异种 气管移植在应用于临床之前面临着诸多需要解决的问题，如供体气管的储 存、移植后免疫排斥反应的控制及气管软骨再生等。既往抑制免疫排斥反 应的主要手段是应用免疫抑制剂，但是气管肿瘤病人明显不适用此种方 法。由于导致气管狭窄的原因当中肿瘤是第一位的，所以寻求其他可以抑 制移植后免疫排斥反应方法是近年来研究的热点。在研究中发现，降低移 植物抗原性可采用冷冻法和去上皮细胞法，其中深低温冷冻法最为常用。 冷冻后的组织既可以保持其原有的活性和组织完整性，又能削减其免疫原 性，这样既解决了供体的保存问题，又解决了移植后免疫排斥反应的控制问 题。但冷冻时间的长短是直接影响移植气管是否成功的关键之一，过长将 会降低移植物生存力，过短则达不到降低免疫排斥反应的目的。合适冷冻 时间的选择成为解决深低温冷冻气管移植成功的关键之一。 目的：本实验通过研究在深低温(．80℃)条件下，对大鼠气管移植 体不同的冷冻保存时间后再移植到受体后的大体及病理改变，进一步了解 不同深低温冷冻时间对大鼠气管移植体各组织活性及免疫原性的影响(对 气管移植体的上皮、单核细胞的影响)，探讨同种异体大鼠气管移植的可 行性及所需冻储的最短时间，为今后深低温冷冻气管移植的临床应用提供 实验依据。 方法：切取SD大鼠气管段后分别移入注满冷冻保护液的冻储管(2m1) 中，放置于4C冰箱中平衡4小时，采用程控降温仪程序降温，降温速率 l℃／分，降至．80℃迅速投入液氮中保存。冷冻保存后，取出冻储管置于 37℃恒温水浴箱中，轻轻摇动，使气管段均匀快速解冻复温。Wistar大鼠 骨环作为供体气管移植体，行同种异体异位移植，包埋于Wistar大鼠腹 中文摘要 腔大网膜内。于术后4周取出气管移植体，行大体及HE染色相关病理病 理学观察，免疫组织化学法检测各组CD3阳性细胞浸润的情况。 按冷冻时间不同分为冷冻组与对照组(F组)，其中冷冻10天组为 C1组，冷冻20天组为C