[2016科研报告].doc

植物保护学院 2010 级科研基本方法课程 科学研究方案设计报告 科研（论文）题 目： 雷公藤提取物对小菜蛾的生物活性 姓 名： 号： 业： 级：20级班 指导教师： 王应伦 二零一一年十月 西北农林科技大学植物保护学院 科研基本方法课程科研方案（设计）实施计划 制药工程 专业 2010级（3） 班 姓名：张 震 科研（论文）题目：雷公藤提取物对小菜蛾的生物活性 立项依据与研究内容 项目的立项依据 研究意义： 小菜蛾（ Plutella xylostella L.）是世界性十字花科蔬菜重要害虫之一，全世界每年防治费用约需 10亿美元。目前，小菜蛾的防治仍然主要依赖于化学农药，但是由于长期不合理地使用化学农药带来了许多弊端，如“三R”问题（有害生物抗药性的产生、残留毒性及害虫再猖獗）和环境污染等。因此，寻找开发对人畜安全、对害虫不易产生抗药性、在自然环境中易于降解的植物源杀虫剂，已越来越受到研究人员的广泛的关注和重视。雷公藤(Tripteryium wilfordii Hook.f)，属卫矛科雷公藤属植物，又称菜虫药、黄藤根、断肠草等，在我国主要分布于长江中下游地区，很早以前就用于医学和防治多种害虫，是有名的杀虫植物之。但目前还未见雷公藤杀虫剂产品问世。因此，我们进行了这方面的研究，旨在为植物源农药开发和雷公藤的综合利用提供科学依据。 国内研究现状： 20世纪30年代我国学者就开始了雷公藤杀虫作用的研究。1935年美国引种，并对其杀虫活性及有效成分进行了探讨。直到70年代初人们发现雷公藤具有明显的抗肿瘤、抗风湿等作用后，其杀虫作用研究便处于停滞阶段。华南农业大学从1980年开始不懈地探索雷公藤的特异性杀虫作用。西北农林科技大学无公害农药研究服务中心对雷公藤的杀虫作用进行了系统研究，取得了很大进展。 参考文献：［1］ 陈冀胜，郑硕. 中国有毒植物. 北京：科学出版社. ［2］ 罗都强，张兴. 杀虫植物雷公藤研究进展. 西北农业大学学报， ［3］ 陈立，徐汉虹，赵善欢. 唐古特瑞香对斜纹夜蛾的拒食活性研究. 华南农业大学学报. ［4］ 童红云，赵善欢. 雷公藤对菜青虫的毒理效应及防治试验. 华南农业大学学报. 项目的研究内容、研究目标,以及拟解决的关键科学问题 研究内容： 1.雷公藤乙醇提取物对小菜蛾幼虫的拒食作用 2.雷公藤乙醇提取物对小菜蛾幼虫生长发育的抑制作用 3.雷公藤乙醇提取物对小菜蛾幼虫的毒杀作用 4.田间药效试用 (2) 研究目标： 通过实验探索出雷公藤乙醇提取物在对小菜蛾幼虫的拒食、生长发育的抑制以及毒杀等方面的作用效果，更重要的是得到对小菜蛾幼虫起作用的雷公藤乙醇提取物的最佳浓度，已便将其投入使用。 （3）拟解决的关键问题： 1.如何得到雷公藤的乙醇提取物。 2.如何通过实验得到对小菜蛾幼虫起作用的雷公藤乙醇提取物的最佳浓度。 3.以何种参数来分别表示拒食作用、生长发育的抑制作用。 4.田间试验时，如何准确得到死亡幼虫的个数。 拟采取的研究方案及可行性分析 （1）研究方案 1.材料：将采自浙江省金华地区的雷公藤根皮烘干，粉碎后用95%的乙醇浸提，并将提取液过滤后用ZFQ—85A型旋转蒸发器浓缩至干，称其重量后加入丙酮溶解，制成高浓度溶液放入冰箱中冷藏，待用。供试的小菜蛾采自浙江省农业科学院试验田，在养虫室内用甘蓝叶饲养，选择同龄期生理一致的健康幼虫供试。养虫和试验用的甘蓝品种均为京丰一号，分期分批种植。 2.雷公藤乙醇提取物对小菜蛾幼虫的拒食作用 2.1选择性取食 将雷公藤乙醇提取物用丙酮稀释成0.8%、0.4%、0.2%、0.1%、0.05%的溶液，待用。将新鲜甘蓝叶碟（面积为2*2=4cm2）在配制好的溶液中浸渍1s，用丙酮作对照。自然挥发1 h 后，将处理叶碟和对照叶碟各2片呈正方形交叉排列放置于直径为9cm、衬有湿滤纸培养皿中，接入已饥饿30 min的4龄小菜蛾幼虫5头，立即置于黑暗的生化培养箱（25±1）°C中。各重复5 次。24h后用座标纸测量被取食的叶面积，并计算拒食率和拒食中浓度AFC50。 拒食率（%）=［（对照组取食面积-处理组取食面积）/ 对照组取食面积］*100 AFC50的计算参照陈立等将拒食率转化为机率值、浓度转化成对数后进行线性回归，然后根据回归方程进行计算。 非选择性取食 叶片处理同选择性取食。在直径为9cm 的培养皿中放入四片叶碟，对照和处理分别摆放于不同的培养皿中，每皿接入4头四龄幼虫，立即置于（25±1）°C,12L:12D的