无菌室标准化规程与验收规范.doc

无菌室标准化规程与验收规范(《洁净室沉降菌测试标准操作规程》) (《洁净室沉降菌测试标准操作规程》) (《洁净室沉降菌测试标准操作规程》)隐藏 窗体底端 无菌室标准化规程与验收规范洁净室沉降菌测试标准操作规程》 (含《洁净室沉降菌测试标准操作规程》) 1.目的本规程旨在为无菌操作及无菌室的保护提供一个标准化规程。 2.适用范围生测实验室 3.责任者 QC 主管生测员 4.定义无 5.安全注意事项严格无菌操作，防止微生物污染；操作人员进入无菌室应先关掉紫外灯。 6.规程 6.1.无菌室应设有无菌操作间和缓冲间，无菌操作间洁净度应达到 10000 级，室内温度保持在 20-24℃，湿度保持在 45-60%。超净台洁净度应达到 100 级。 6.2.无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。 6.3.严防一切灭菌器材和培养基污染，已污染者应停止使用。 6.4.无菌室应备有工作浓度的消毒液，如 5％的甲酚溶液，70％的酒精， 0.1％的新洁尔灭溶液，等等。 6.5.无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁， 以保证无菌室的洁净度符合要 求。 6.6.需要带入无菌室使用的仪器，器械，平皿等一切物品，均应包扎严密， 并应经过适宜的方法灭菌。 6.7.工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间 更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用 70%的乙醇再次擦拭双手)，方可 进入无菌室进行操作。 6.8.无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌 30 分钟以上，并且同 时打开超净台进行吹风。操作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照灭菌 20 分钟。 6.9.供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检查前， 用 70％的酒精棉球消毒外表面。 6.10.每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。 6 .11.吸取菌液时，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管。 6.12.接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧灭菌，待冷却后，方可接种 培养物。 6.13.带有菌液的吸管，试管，培养皿等器皿应浸泡在盛有 5%来苏尔溶液的 消毒桶内消毒，24 小时后取出冲洗。 6.14.如有菌液洒在桌上或地上，应立即用 5%石碳酸溶液或 3％的来苏尔倾 覆在被污染处至少 30 分钟，再做处理。工作衣帽等受到菌液污染时，应立即脱 去，高压蒸汽灭菌后洗涤。 6.15.凡带有活菌的物品，必须经消毒后，才能在水龙头下冲洗，严禁污染 下水道。 6.16.无菌室应每月检查菌落数。在超净工作台开启的状态下，取内径 90mm 的无菌培养皿若干，无菌操作分别注入融化并冷却至约 45℃的营养琼脂培养基 约 15ml，放至凝固后，倒置于 30～35℃培养箱培养 48 小时，证明无菌后，取平 板 3～5 个， 分别放置工作位置的左中右等处， 开盖暴露 30 分钟后， 倒置于 30～ 35℃培养箱培养 48 小时，取出检查。100 级洁净区平板杂菌数平均不得超过 1 个菌落，10000 级洁净室平均不得超过 3 个菌落。如超过限度，应对无菌室进行 彻底消毒，直至重复检查合乎要求为止。 7.参照参照《药品卫生检验方法》 《中国药品检验标准操作规范》中 (无菌检查 法)章节 中华人民共和国医药行业标准 YY/T0188.6-1995《药品检验操作规程》 8.分发部门质量管理部 无菌室技术指导说明在获得了无菌环境和无菌材料后，我们还要保持无菌状态，才能对某种特定 的已知微生物进行研究或利用它们的功能，否则外界的各种微生物很容易混入。 外界不相干的微生物混入的现象，在微生物学中我们叫做污染杂菌。防止污染是 微生物学工作中十分关键的技术。一方面是彻底灭菌，另一方面防止污染，是无 菌技术的两个方面。另外，我们还要防止所研究的微生物，特别是致病微生物或 经过基因工程改造了的本来自然界不存在的微生物从我们的实验容器中逃逸到 外界环境中去。为了这些目的，在微生物学中，有许多措施。 无菌室内的地面、墙壁必须平整，不易藏污纳垢，便于清洗。工作台的台面 应该处于水平状态。无菌室和缓冲间都装有紫外线灯，无菌室的紫外线灯距离工 作台面 1 米。工作人员进入无菌室应穿灭过菌的服装，戴帽子。 当前无菌室多存在于微生物工厂，一般实验室则使用超净台。超净台其主要 功能是利用空气层流装置排除工作台面上部包括微生物在内的各种微小尘埃。 通 过电动装置使空气通过高效过滤器具后进入工作台面， 使台面始终保持在流动无 菌空气控制之下。 而且在接近外部的一方有一道高速流动的气帘防止外部带菌空 气进入。 在条件较困难的地方，也可以用木制无菌箱代替超净台。无菌箱结构简单， 便于移动，箱正面开有两个洞，不操作时用推拉式小门挡住，操作时可以将双臂 伸进去。正面上部装有玻璃，便于在内部操作，箱内部装有紫