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木若0714 课题： DNA重组技术的 基本工具 第一步：获取目的基因 基因工程培育转基因斑马鱼过程 培育转基因斑马鱼的关键步骤 一、 “分子手术刀”——限制酶 在自然界中有一些生物的DNA可能进入另一种生物的细胞中。我们有没有学过相关的实例？ 这类原核生物之所以长期进化而不绝灭，有何保护机制？ 1、关于限制酶的说法中，正确的是 A、限制酶是一种酶，只识别GAATTC 碱基序列 B、EcoRⅠ切割的是G-A之间的氢键 C、限制酶一般不切割自身的DNA分子、只切割外源DNA D、限制酶只存在于原核生物中 二、 “分子缝合针”—DNA连接酶 3、DNA连接酶催化的反应是（ ） A、DNA复制时母链与子链之间形成氢键 B、黏性末端碱基之间形成氢键 C、两个DNA片断黏性末端之间的缝隙的连接 D、A、B、C都不正确 三、“分子运输车”—载体 携带目的基因进入受体细胞 扩增目的基因 3、作为基因的运输工具——载体，必须具备的条件及理由是（ ） A. 能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因 B. 具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达 C 具有某些标记基因，以便为目的基因的表达提供条件 D. 能够在宿主细胞中复制并稳定保存，以便于进行筛选 下列关于限制酶和DNA连接酶的理解正确的是 A、其化学本质都是蛋白质 B、DNA连接酶可以恢复DNA中的氢键 C、在基因工程操作中可以用DNA聚合酶代替DNA连接酶 D、他们不能被反复的利用 （双选）关于质粒的叙述正确的（ ） A. 质粒是能够自我复制的环状DNA分子 B. 质粒是基因工程常用的载体 C. 重组质粒是目的基因 D. 质粒可在宿主外单独复制 糖尿病是一种常见病，且发病率有逐年增加的趋势，以致发达国家把它列为第3号“杀手”。请回答下列问题： （1）目前，对糖尿病的治疗，大多采用激素疗法，所用激素为 ，由 细胞分泌。 （2）目前检测尿糖常用的试剂为 ，糖尿遇该试剂加热后呈 色。 （3）所用激素过去主要是从动物的内脏中提取，数量有限，现大多采用基因工程的方法生产（如图所示）。 ① d为 。 ② 获得f，必须先用 切割b和d，使它们产生相同的黏性末端，再加入适量的 方可形成。 ③ b的名称是 ，其化学本质为 。 中国基因工程网 / 绿谷生物网 / 中国科学院 / 中国知网 / 必做：《创新设计》基础题 、提高篇选择题第2题 非选择题第1题 选作： 《创新设计》提高篇题目其他题目 拓展迁移 胰岛素 胰岛B 斐林试剂 砖红色 拓展迁移 目的基因 同一种限制酶 DNA连接酶 质粒 DNA 课题延伸 基因工程三大工具研究进展如何？ 作业 * 基因工程基本步骤： 第二步：目的基因与运载体结合 第三步：将目的基因导入受体细胞 第四步: 目的基因的表达和检测 观“鱼”识水质 复旦大学培育出 转基因斑马鱼 （视频） 情景导入 . . . 简述培育转基因斑马鱼的过程 培育转基因斑马鱼的关键步骤有哪些？ 解决这些关键步骤需要哪些工具？ 情景导入 普通斑马鱼 提取 荧光蛋白基因 与运载体DNA拼接 导入 荧光斑马鱼 水母 智慧共享 情景导入 . . . 荧光蛋白基因从水母细胞内提取出来 荧光蛋白基因与运载体DNA连接 荧光蛋白基因导入受体细胞 智慧共享 情景导入 三大工具 分子手术刀——限制性内切酶 分子缝合针——DNA连接酶 分子运输车——运载体 基因工程常用工具 智慧共享 情景导入 1 2 3 来源？ 特点？ 结果？ 探究1 互动课堂 来源： 主要在原核生物中 限制酶的来源 资料分析： 观察表格、尝试归纳限制性内切酶的特点 限制酶的特点 识别双链DNA分子中 特定核苷酸序列 切割特定序列中的 特定位点 专一性 限制酶作用的化学键 拓展 磷酸 二酯健 氢键 √ 限制酶作用的结果 结果 C 及时反馈 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同种限制酶切割(EcoRⅠ) 2、把两种来源不同的DNA进行重组，应该怎样处理？ 及时反馈 缺口怎么办？ G C T T