东北红豆杉(Taxus+cuspidata)中紫杉烷类化合物抗肿瘤细胞增殖活性及其作用机制初步的研究.pdf

中文摘要 东北红豆杉(Taxus 肿瘤细胞增殖活性及其作用机制的初步研究 摘 要 紫杉醇是美国北卡罗莱纳州三角研究所的Wall博士和 Wani博士于1967年发现的。之后，他们又从太平洋红豆杉中 分离出了这种化合物并发现它具有广泛的抗恶性肿瘤作用。 紫杉醇是至今所知的最好的治疗卵巢癌和乳腺癌的药物，价 格非常昂贵，市场售价为4800美元／克。并且它的自然资源一 红豆杉和东非罗汉松(1999年测知含紫杉醇)均生长十分缓 慢，数量有限且其中有效成分的含量非常低。东北红豆杉 (Taxus 000米的 cuspidata)是常绿乔木，散生于海拔500至1 密林中，适合冷且潮湿的酸性土壤，分布于朝鲜、俄罗斯远 东地区、日本和我国的黑龙江东南部、吉林东部及辽宁。 目的：随着近年来对紫杉醇及其前体物的需求量不断攀 升，寻找新的生物资源保护生态环境已迫在眉睫。研究者们 近年来通过提取分离得到了大量的紫杉醇类似物，但迄今为 止仍没有紫杉醇的第二代药物上市。目前紫杉烷类成分只有 紫杉醇和以巴卡亭III或10．去乙酰基巴卡亭III为前体的半合 类药物的研究主要是寻找具有较低毒副作用、较高抗肿瘤选 择性及对多种肿瘤细胞尤其是对有抗药性的人体肿瘤细胞 有较高生物活性的紫杉烷类化合物。本研究的目的就是将从 东北红豆杉中分离及纯化得到的紫杉烷类化合物进行抗肿 瘤细胞增殖活性的筛选，为开发新的抗肿瘤药物提供理论依 中文摘要 据。 方法：1应用MTT比色法对所选取的东北红豆杉中的紫 衫烷类化合物进行抗肿瘤细胞增殖的活性筛选。首先考察具 有不同母核结构的紫衫烷类化合物对宫颈癌HeLa细胞增殖 的影响；然后考察具有相同母核结构、不同连接侧链的紫衫 烷类化合物对HeLa细胞增殖的影响；最后选择母核结构和侧 链都相同的紫衫烷类化合物，考察母核上的不同取代基对紫 衫烷类化合物抗HeLa细胞增殖的影响。2选择具有活性母核 结构、活性侧链和取代基的紫杉烷类化合物，考察它们对五 种肿瘤细胞增殖的抑制作用。3机制研究：采用细胞增殖抑 制试验，以Taxol作为阳性对照，观察HeLa细胞在经筛选出 的活性化合物Compound 细胞浓度，绘制细胞增殖曲线以进行比较。流式细胞仪及 检测经化合物2仅，1 II处 9的表达。 理的HeLa细胞中Bax、Bcl一2、Caspase3矛llCaspase 结果：1 E(17) 即使用100 对HeLa细胞的增殖不显示任何抑制活性；6／8／6母核结构的化 合物DecinnamoytaxinineE(12)、6／5／5／6母核结构的化合物 Taxinine A(24) 三种化合物用100 显示较弱的抑制活性，生存率分别为74％、73％和71％，与 空白对照相比均有显著性差异(尸O．05)。 2 2．16／8／6母核结构的5位碳原子上连接具有水溶性的糖 中文摘要 侧链的紫杉烷类化合物(10)，用1 ％；在6／8／6母核结构的5位碳原子上连接具有脂溶性的 Winterstein倾lJ链的紫杉烷类化合物(2)，用1 gmol／L、109mol／L 活性，均呈现较好的剂量依赖关系。 2．2只具有6／12母核结构，没有连接任何侧链的化合物 gmol／L、l (24)用l Opmol／L和1 其生存率分别为100％、100％和65％，未显示一个明显的抗 肿瘤细胞增殖活性的提高。 2．3只具有6／5／5／6母核结构，没有连接任何侧链的化