定性测定的性能验证要点.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 新旧批号试剂的比对 地点（包括环境条件）、仪器、标本、时间、人员均相同。只有试剂批号不同。 标本： 20份以上的临床样本，可包括不同浓度（强、中、弱）阳性样本及一定数量阴性样本。标本可为已知结果，亦可为未知结果日常临床样本（此时，可加数份已知阳性样本）。 检测：严格按照SOP进行操作。可选择1份弱阳性样本重复检测20孔，以观察不同批试剂的批内变异的差异。 此外，亦可观察不同批试剂的批间变异（可通过在实际工作中定期分析总结进行） 对性能验证的一点个人想法 要做！ 怎么做：按照制定的SOP做！ 怎么写SOP：参照标准的方法写，但可以适当简化！ 一个标准：以满足临床需求为前提！以临床医生满意为前提！  谢谢！ * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 样本的准备 质控品：使用商品化质控物进行，包括阴性和阳性。 样本的采集和保存：采集时间、保存方式等必须保证一致性。 CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline 重复性验证 CUT-OFF的重复性（同时包含测定下限的验证） 批内变异的验证 批间变异的验证 重复性验证的质量控制 质控品：如方法学比较在10天内完成，则每一批次都要对每份质控样本进行检测，共提供20次重复检测结果。如果方法比较研究超过20天，则每一批次都要对每份对照样本进行单次检测，总计也提供20次重复结果。 如出现失控，则当次检测结果无效。在当天或第二天安排新批次的检测以替换不合格的批次。实验室要分析失控的原因。不合格批次在10天内不应超过1次或20天内不超过两次。如若超出，所在实验室应中止检测工作并咨询试剂制造商以确定原因并采取纠正措施。 CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline 重复性验证：样本浓度 CUT-OFF重复性验证：样本浓度应接近临界值。不宜用阴性或强阳性样本。 批内和批间变异验证：高、中和低三个浓度（与试剂盒说明书中所述相适应） CUT-OFF重复性和测定下限验证 临界点的定义 同样一份样本，在多次重复实验中各有50%的几率获得阳性或阴性的结果时该分析物的浓度。 CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline 临界点（CUT-OFF)与试剂盒阳性反应判断值（CUT-OFF值）的区别 这里的临界点指的是一个处于试剂检测临界点的样本浓度，其一旦确定，是不变的。 试剂盒CUT-OFF值指的是一个判断某一次测定结果的由阴性和阳性对照信号值按一定公式计算出来的信号值，每次测定都会有所差异。 如何获得系统或试剂的“临界点” 检测试剂或系统的说明书可能会注明分析物的临界浓度。 如果临界浓度未知，则可以将阳性样本进行一系列稀释，然后将他们进行重复检测以确定能够获得50%阳性和50%阴性结果的那个稀释度。这一稀释度的分析物浓度即为临界点。 CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline 临界点（CUT-OFF）的(精密度）重复性指的是什么？ 是为正在评价的检测试剂或系统建立分析物的临界浓度(C50)，并且确保临界浓度±20%的范围处于95%区间内(C95)。 CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline 不精密度曲线 两种不同方法的不精密度曲线比较 验证步骤 制备足够40次重复检测的3份样本：分别为处于临界浓度、高于临界浓度20%和低于临界浓度20%的样本。 重复检测样本40次，确定每一份样本结果为阳性和阴性的百分比。 评价临界浓度是否准确？评价+20至-20%的浓度范围是否包含于、位于或者超出这种方法的95%区间？ CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative