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临床药学年会省肿瘤贺宝霞.ppt
实 验 流 程 冠心病患者 CYP3A4*1/*1G PCR-RFLP CYP3A4*1/*1 CYP3A4*1G/*1G 单次给药,定时取血 LC/MS/MS检测 AT及o-AT的浓度 比较不同基因型 的药动学参数 结 果 4 研 究 背 景 1 研 究 内 容 2 研 究 方 法 3 结 论 与 展 望 5 报 告 内 容 冠心病患者入选标准: 经冠脉造影诊断为冠心病的男性患者; 肝肾功能正常; 年龄45-65岁; 近期未服用过阿托伐他汀及影响阿托伐他汀药动学的 药物如吉非贝齐等,或曾服用但已停药2周以上; 研 究 方 法 所有受试者均为CYP3A5*3/*3及OATP1B1*1/*1基因型。 排除标准: 研 究 方 法 肝肾功能不全、恶性肿瘤、糖尿病等分泌代谢疾病患者; 两个月内服用过贝特类等影响胆固醇水平的药物者; 服用环孢素A等可能影响OATP1B1 转运功能的药物者; 服用糖皮质激素等可能影响CYP3A代谢功能的药物者; 嗜烟酒或药瘾者. 研 究 方 法 所有受试者经过禁食一晚(12~16 h); 次日早晨8:00 口服20mg单剂量阿托伐他汀钙; 采取服药前和服药后0.33、0.66、1、1.5、2、2.5、3、4、 6、9、12、24和48 h的前臂静脉血4 mL; 15 min内3500 rpm离心并分离血浆,置于- 70℃备用。 临床试验方案: 研 究 方 法 仪器: Agilent 1200RRLC/6410 QQQ 药品与试剂: 阿托伐他汀(AT)对照品 2-羟阿托伐他汀(o-AT)对照品 内标:匹伐他汀原料药 药品:立普妥(20mg, 辉瑞) 离子源:电喷雾离子源(ESI) 毛细管电压(Capillary):4000 V 雾化气压力(Nebulizer):45 psi 干燥气流量:10 L·min-1 干燥气温度:350 ℃ 离子化模式:正离子化(positive) 扫描方式:多重反应监测(MRM) 放大信号:400 质谱条件: ESI 研 究 方 法 Segment Compound AT o-AT Internal standard Precursor ion (m/z) 559.4 575.2 422.1 Product ion (m/z) 440.3 440.2 290.2 Collision energy(v) 20 21 22 Fragmentor(v) 180 110 160 分析物及内标的母离子、子离子、碰撞能量和碎片电压 研 究 方 法 色谱柱: Agilent Zorbax SB C18 (2.1 mm×100mm,3.5 μm); 流动相: 水-乙腈(各含5%甲醇和0.01%甲酸)=(45:55) 流 速: 0.2 mL·min-1 进样量: 20μL 柱 温: 40℃ 色谱条件: 研 究 方 法 内标 8μL 乙酸乙酯:二氯甲烷( 4:1) 5 mL 高速离心2min 研 究 方 法 血浆样品的处理: 血浆500μL 0.1 mol? L-1 醋酸钠 (PH=5.0) 500μL 涡旋 离心 上清液4mL 氮气吹干 流动相200μL 20uL进样 方法特异性 标准曲线 稳定性 精密度 回收率 方法学 评价 准确度 研 究 方 法 结 果 4 研 究 背 景 1 研 究 内 容 2 研 究 方 法 3 结 论 与 展 望 5 报 告 内 容 单次口服20 mg 阿托伐他汀钙后CYP3A4不同基因型阿托伐他汀(A)和2-羟阿托伐他汀(B)的平均血浆药物浓度-时间曲线。 结 果 — 不同基因型的药动学参数 口服20mg阿托伐他汀钙后CYP3A4不同基因组AT的药动学参数 #表示*1G/*1G组与*1/*1组比较;*表示*1G/*1G组与*1/*1G组比较 AT的AUC0-∞、Tmax和CL/F在*1G/*1G 组显著低于*1/*1 组 Genotype AUC0-∞ [ng·h·mL-1] Cmax [ng·mL-1] Tmax [h] t1/2 [h] CL/F(L/h) *1/*1 (n=10) 60.3±25.6 10.8±6.1 1.36±0.52 9.6±2.4 27.8±9.3 *1/*1G (n=6) 51.4±26.9 8.9±4.3 1.18±0.47 8.9±2.7 32.6±6.7 *1G/*1G (n=4) 38.4±27.8 7.5
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