胭脂鱼维氏气单胞菌和中间气单胞菌的鉴定及药物敏感性.pdfVIP

第32卷第4期 水 产 科 学 V01．32NO．4 FISH 2013年4月 ERIESSCIENCE Apr．2013 胭脂鱼维氏气单胞菌和中间气单胞菌的鉴定及药物敏感性 黄文明，王 利，冀国桢，韦 璇，王海娟，赵 静，苟小兰，龙钟明 (西南民族大学生命科学与技术学院动物遗传育种学国家民委一教育部重点实验室，四川 成都 610041) 摘要：由发病的胭脂鱼体内分离出两株细菌YZ-1和YZ-2，进行常规的形态学观察、生理生化试验， 16S rDNA序列分析和药敏试验。试验结果表明，两株菌均为发酵型，具动力性的革兰氏阴性菌。菌株 YZ-1和YZ-2的16S 分析发现与GenBank数据库中维氏气单胞菌和中间气单胞菌的不同菌株16SrDNA基因序列同源性 最高，相似性达99％；系统发育树显示这两株菌分别与维氏气单胞菌和中间气单胞菌不同菌株聚为 一簇，从而判定YZ一1为维氏气单胞菌，YZ一2为中间气单胞菌。药敏试验结果显示，四环素、恩诺沙 星、氟苯尼考、庆大霉素对两株菌有较好的抑制效果。为气单胞菌的鉴定及胭脂鱼细菌病防治等提 供科学依据。 关键词：胭脂鱼；维氏气单胞菌；中间气单胞菌；16SrDNA；系统发育分析；药敏试验 中图分类号：$917．1 文献标识码：A 文章编号：1003一1111(2013)04—0210—05 胭脂鱼(Myxocyprinusasiaticus)又名血排、火胭脂鱼的疾病防治具有重要的意义。本研究由一 排、粉排、红鱼、燕雀鱼、中国帆鳍吸鱼等，属鲤形 条体表少量鳞片脱落，腹部明显充血且有出血点， 目、亚口鱼科，主要生长于长江水系和闽江水系。 肛门红肿的胭脂鱼体内分离得到两株细菌，并进行 胭脂鱼因全身呈黄褐色或胭脂红而得名，色彩鲜 了常规的生理生化试验、16SrDNA序列分析及药 明，体型奇特，尤其幼鱼体形别致，因背部隆起如一 敏试验，从而为胭脂鱼细菌性疾病的防治积累科学 风帆，有“一帆风顺”的美称；1989年荣获世界观赏 资料。 鱼博览会银奖，其后被誉为“亚洲美人鱼”[1]。胭脂 1材料与方法 鱼不仅具有重要的观赏价值，也是重要的名贵经济 鱼类，生长快，肉嫩鲜美，鱼肉中营养价值丰富。由 1．1 材料 于过度捕捞，环境的恶化及胭脂鱼本身的繁殖周期 发病胭脂鱼采自成都某海洋馆，体长36cm，体 长等原因，野生数量已锐减，现已被列为国家二级 质量1200 g，眼球充血，腹部有明显出血点，体表少 保护动物[2]。近年来，随着胭脂鱼人工繁殖技术的 量鳞片脱落，肛门红肿，并有大量黏液流出。血平 成熟和本身可观的经济价值，人工集约化养殖在不 板、营养琼脂、生化鉴定管、药敏纸片购自杭州微生 MarkerDL2000 断扩大，随之而来的病害也越来越严重，给养殖者 物试剂有限公司。TaqMix、DNA 造成损失的同时也制约了胭脂鱼养殖业的发展。 购自北京天根生化科技有限公司。 迄今为止，关于胭脂鱼的研究主要集中在对胭脂鱼 1．2方法 的繁殖发育与人工养殖、饲料和遗传多样性方面， 1．2．1细菌的分离 尚鲜见到有关胭脂鱼致病菌方面的研究。张奇亚 无菌操作取患病胭脂鱼的心、肝等病变组织， 等[3]自患致死性出血综合症的胭脂鱼中分离到弹 接种到血琼脂平板和营