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高频考点例析 (一)DNA分子的提取和分离 (1)在提取菜花细胞中的DNA时,采用的是研磨法,为什么不能像用鸡血那样,用蒸馏水使其破裂? (2)在提取实验过程中用到两种浓度的NaCl溶液,说明其作用: ①2 mol/L NaCl溶液:____________; ②0.14 mol/L NaCl溶液:__________。 高频考点例析 (3)在整个操作过程中,每100 mL血液中加入3 g柠檬酸钠的作用是:________________________________________________________________________。 (4)鉴定DNA所用的试剂:________。 (二)血红蛋白的提取和分离 在血红蛋白的提取和分离过程中:粗分离、纯化和纯度鉴定时,都会用到缓冲溶液,其作用是________________________。 高频考点例析 (三)不同的化学物质,其理化特性不同,提取方法也有所差异,如胡萝卜素不溶于水,易溶于________,因此可以用________方法进行提取。 高频考点例析 【解析】 (一)(1)DNA分子提取的理想材料为富含DNA的细胞,动物中鸡血红细胞具有细胞核,放入蒸馏水中会使细胞涨破释放出DNA,而植物细胞中含有细胞壁不能因吸水而涨破。(2)实验过程中用到NaCl溶液,2 mol/L的NaCl溶液用于溶解DNA,而0.14 mol/L的NaCl溶液会使DNA析出。(3)为了防止凝血现象的发生应加入柠檬酸钠。(4)鉴定DNA所用的试剂为二苯胺。 高频考点例析 (二)为保持蛋白质的生理活性,防止变性,用缓冲液保持pH的稳定。 (三)胡萝卜素的化学性质比较稳定,不溶于水,易溶于有机溶剂。因此可以用有机溶剂作为萃取剂,以萃取的方法来提取。 高频考点例析 【答案】 (一)(1)植物细胞具有细胞壁,不会吸水涨破,只有通过研磨,才能释放出DNA。 (2)①溶解DNA分子,过滤并除去不溶于NaCl溶液的杂质 ②使DNA分子析出,过滤并除去溶于NaCl溶液中的杂质 (3)防止出现凝血 (4)二苯胺 (二)维持血红蛋白所处环境中pH的稳定 (三)有机溶剂 有机溶剂萃取 高频考点例析 考点二 PCR原理及过程 例2 (2010年广东深圳模拟)多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。请回答下列有关PCR技术的基本原理及应用问题。 (1)DNA的两条链是反向平行的,通常将________的末端称为5′端,当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后,DNA聚合酶就能从引物的________开始延伸DNA链。 高频考点例析 (2)PCR利用DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题,但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。到20世纪80年代,科学家从一种Taq细菌中分离到________,它的发现和应用解决了上述问题。要将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来,所用的培养基叫______________________________。 高频考点例析 (3)PCR的每次循环可分为________________________________________________________________________ 三步。假设在PCR反应中,只有一个DNA片段作为模板,请计算在5次循环后,反应物中大约有________个这样的DNA片段。 (4)请用简图表示出一个DNA片段PCR反应中第二轮的产物。 (5)简述PCR技术的主要应用。 高频考点例析 【解析】 (1)DNA聚合酶工作时必须要有一个引物,它只能把新的核苷酸加到已经存在的核酸的3′-羟基上,与DNA母链结合的RNA引物就提供这个羟基。(2)因PCR利用了DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题,所以用于催化DNA复制过程的DNA聚合酶要具有耐高温的特性。用选择培养基可将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来。(3)DNA复制两条链均作为模板,进行半保留式复制,所以复制5次后得到的子 高频考点例析 代DNA分子数为25=32个。(4)新合成的DNA链带有引物,而最初的模板DNA的两条链不带有引物。(5)PCR技术可以对DNA分子进行扩增,所以可用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等方面。 高频考点例析 【答案】 (1)磷酸基团 3′端 (2)耐高温的Taq-DNA聚合酶 选择培养基 (3)变性、复性和延伸 32 (4) 高频考点例析 (5)遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定(要求3项以上)。 随堂即时巩固 点击下载 * 基础知识梳理 一、血红蛋白的提取和分离 1.凝胶色谱法:也称
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