2013年2月23日组会报告解读.ppt

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2016-04-05 发布于湖北
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2013年2月23日组会报告解读.ppt

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* Regular Meeting Report 2013.02.23 Plasmids Identification Lrp6+DNMT1/DNMT3B Lrp6+Cell Proliferation Lrp6·ΔE3-4+SLDL·pcs Lrp6·ΔE1-2+SLDL·pcs EP2-Topo Lrp6·ΔE1-4·pcs Lrp6·ΔE3-4·pcs Lrp6-ΔL-pcs Lrp6·ΔE1-2·pcs Lrp6-FL-vsvg Lrp6-ΔC-vsvg Lrp6-ΔN-pcs Lrp6·E1-4·pcs Lrp6-SLDL-pcs Lrp6·E3-4·pcs Lrp6·E1-2·pcs Lrp6-FL-misha Lrp6-FL-pcs Lrp6-FL-6myc without 4×SDS buffer with 4×SDS buffer with 4×SDS buffer Effects of Lrp6 on DNA Methylation DNMT3B DNMT1 HT-29 DNMT3B DNMT1 LS-174T DNMT3B DNMT1 DLD-1 - + βCatenin - +↓ Lrp6-ΔC - + Lrp6-ΔN - +↓ Lrp6-FL - （+） WT(V) PGE2 A·Westernblot 摸一下PGE2刺激浓度及刺激时间，稳定地观察到Lrp6的N端能够明显地下调DNMT1的表达 B·BSP 在A的基础（最佳条件）上用BSP方法予以证实 A·检测一下HT-29/LS-174T细胞内Lrp6及βCatenin的表达水平 B·Westernblot 稳定地观察到敲除Lrp6和加入DKK后DNMT1表达水平相较WT上调 C·BSP 在B的基础（最佳条件）上用BSP方法予以证实 - + βCatenin - +↑ DKK - +↑ si Lrp6 - (+) WT PGE2 - +↓ EP4inhibitor - (+) WT PGE2 稳定地观察到加入EP4受体抑制剂之后，DNMT1表达水平下降进一步探究Lrp6和EP4蛋白相互作用的一些情况（IP） Effects of Lrp6 on Proliferation Cultured in serum free before stimulated by PGE2 h h % DLD-1 24/36/48/72 48/72 0/0.1/0.5/2/10/20 LS-174T stimulated time cultured time serum condition HT-29 3 Conditions 1·转染后在无血清的条件下培养48/72h后PGE2给药刺激48/72h 2·使用Promega公司的CellTiter观察细胞增殖状况（ATP）转入Lrp6之后能够强烈地促进细胞增殖 *