动物生理学实验课件1.ppt

动物生理学实验 多媒体教学+动手操作训练 学时：27（36）学时 山东农业大学动物生理学教研室 动物生理学实验课的要求 遵守学习纪律，准时上、下课。实验期间不得无故外出或早退。特殊情况下，应向教师请假。 爱护公共财物，注意节约各种实验用品。实验动物按组发给，如需补充使用，须经教师同意才能补领。 实验结果存在固定的盘上，每组上课时记住带一张盘，实验结束后立即将结果拷出。 切勿在电脑上设置密码，带的盘要干净，免得电脑被感染病毒。 保持实验室清洁整齐，随时清除污物。实验完毕后，应将实验器材、用品收拾妥当；将手术器械擦洗干净，清点数量，放回原处。经教师检查后才能离开实验室。 实验前必须仔细预习实验指导，了解实验的目的要求、基本原理以及简要的操作步骤。 复习有关理论，以便提高实验过程中的主动性和效率，并进一步巩固有关理论知识 实验报告 动物生理学实验基本操作技术 一、常用手术器械 蛙类实验手术器械： 剪刀、镊子、金属探针、玻璃分针、铜锌弓、蛙心夹、蛙板等。 哺乳动物手术器械： 手术刀、止血钳、咬骨钳、动脉夹、气管插管、血管插管（包括静脉插管和动脉插管）等。 止血钳 手术刀 手术剪和手术镊 二、手术器械的消毒方法 煮沸消毒法：一般用蒸馏水加热，水沸3~5min后，将器械放入消毒锅内，等第二次水沸后15min，对怀疑有芽孢感染的，必须煮沸60min以上 高压蒸汽灭菌法：高压灭菌锅，蒸汽压15~20lb/in2，温度121.6~126.6?C，30min左右。不宜于橡胶制品和锐利器械的灭菌。 化学药品消毒法：常用消毒剂有：LJ-强化戊二醛、70%乙醇（不适于金属器械的消毒）、0.1%新洁尔灭、酶皂溶液、甲醛溶液等，金属器械应浸泡30min以上。（见下表） 烧灼灭菌法，适用于金属器械 三、常用实验动物 青蛙和蟾蜍 家兔 大白鼠和小白鼠 鱼类 鸟类等 实验动物的抓取固定方法 蟾蜍 蛙类抓取方法宜用左手将动物背部贴紧手掌固定，以中指、无名指、小指压住其左腹侧和后肢，拇指和食指分别压住左、右前肢、右手进行操作。 在抓取是蟾蜍时，注意勿挤压其两则耳部突起之毒腺，以免毒液射进眼中。 实验如需长时间观察，可破坏其脑脊髓（观察神经系统反应时不应破坏脑脊髓）或麻醉后用大头针固定在蛙板上。依实验需要采取俯卧位或仰卧位固定。 家 兔 抓取：实验家兔多数饲养在笼内，所以抓取较为方便，一般以右手抓住兔颈部的毛皮提起，然后左手托其臀部或腹部，让其体重重量的大部分集中在左手上，这样就避免了抓取过程中的动物损伤。不能采用抓双耳或抓提腹部。(1、2、3均为不正确的抓取方法（1．可损伤两肾，2．可造成皮下出血，3．可伤两耳），4、5为正确的抓取方法。颈后部的皮厚可以抓，并用手托兔体) 台式固定：做血压测量、呼吸等实验和手术时，则需将兔固定在兔台上，四肢用粗棉绳活结绑住，拉直四肢，将绳绑在兔台四周的固定木块上，头以固定夹固定或用一根粗棉绳挑过兔门齿绑在兔台铁柱上。 几种常用生理盐溶液的配制 生理性溶液为代替液，用于维持离体的组织、器官及细胞的正常生命活动。它必须具备下列条件：⑴渗透压与组织也相等；⑵应含有组织、器官维持正常机能所必需的比例适宜的各种盐类离子；⑶酸碱度应与血浆相同，并具有充分的缓冲能力；⑷应含有氧气和营养物质。 动物实验中常用的生理盐溶液有生理盐水、任氏（Ringer）溶液、乐氏（Locke）溶液和台氏（Tyrode）溶液四种，其成分各异，如下表所示。 各种生理盐溶液的用途? 生理盐水：即与血清等渗之NaCl溶液，在冷血动物应用0.6%-0.65%，在温血动物应用0.85%-0.9%。 任氏溶液：用于青蛙及其他冷血动物。 乐氏溶液：用于温血动物之心脏、子宫及其它离体脏器。用作灌注液者须于用前通入氧气泡15分钟。低钙乐氏液（含无水氯化钙0.05g）用于离体小肠及豚鼠的离体支气管灌注。 台氏溶液：用于温血动物之离体小肠。 动物的麻醉 在急、慢性动物实验中，手术前均应将动物麻醉，以减轻或消除动物的痛苦，保持安静状态,从而保证实验顺利进行。 理想的麻醉药品应当是对动物麻醉完善，其毒性和对生理功能干扰最小，使用方便。 1．常用麻醉剂的种类和用法 局部麻醉剂：0.5%-1.0%盐酸普鲁卡因或2%盐酸可卡因用作皮肤或黏膜表面麻醉。 全身麻醉剂：发挥性的乙醚，非挥发性的巴比妥类、氨基甲酸乙酯等，在生理学实验中，多采用全身麻醉剂。 2. 麻醉前的准备工作 熟悉麻醉药品的特点??? 根据实验内容合理选用麻醉药。 麻醉前应核对药物名称；检查药品有无变质或过期失效。 狗、猫等手术前应禁食12小时，以减轻呕吐反应。 需在全麻下进行手术的慢性实验动物，可适当给予麻醉辅助药。例如，皮下注射吗啡镇静止痛，注射阿托品减少呼吸道分泌物的产生等。 3.