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【总结提升】动物细胞培养的特殊条件 (1)胰蛋白酶的用法:首先用胰蛋白酶处理幼龄动物的器官或组织,以制备单细胞悬液;培养过程中细胞发生接触抑制时,同样需要用胰蛋白酶使细胞分散开。 (2)避免杂菌污染的措施:培养液灭菌处理;加入抗生素;定期更换培养液。 (3)特殊的营养条件。 ①液体培养基。 ②加入动物血清。 ③通入氧气以满足代谢的需要。 ④通入二氧化碳以维持培养液的pH。 【变式训练】用动植物成体的体细胞进行离体培养,下列叙述正确的是( ) A.都需要将组织细胞分散为单个细胞 B.都须用液体培养基 C.都要在无菌条件下进行 D.都可体现细胞的全能性 【解析】选C。植物组织培养用固体培养基,可以直接培养离体的植物器官、组织或细胞,动物细胞培养必须分散为单个细胞;植物组织培养可得到完整的植物体,体现了细胞的全能性,动物细胞培养获得的是动物细胞或代谢产物,未体现细胞的全能性;植物组织培养和动物细胞培养均需要在无菌条件下进行。 细胞的全能性 脱分化 再分化 核移植 植物体细 胞杂交 植物组织 培养 第2讲 细胞工程 一、植物组织培养与动物细胞培养的比较 _________、传代培养 _______、再分化 过程 葡萄糖、氨基酸、无机 盐、维生素、_________ 水、无机盐、维生 素、蔗糖、氨基酸、 植物激素、琼脂 培养基 的成分 液体(合成培养基) 固体 培养基的 物理性质 _________ _____________ 原理 动物细胞培养 植物组织培养 细胞的全能性 细胞增殖 动物血清 脱分化 原代培养 ①蛋白质生物制品的生产 ②皮肤移植材料的培育 ③检测有毒物质 ④生理、病理、药理等 研究 ①微型繁殖 ②_________ ③生产人工种子 ④___________ ⑤突变体的利用 ⑥细胞产物的工 厂化生产 应用 ①用_________制备单细 胞悬液 ②培养液中加入_______ 防止杂菌感染;通入一定 浓度___维持pH 无菌、无毒,植物 激素如_______、 ___________ 条件 动物细胞培养 植物组织培养 生长素 细胞分裂素 胰蛋白酶 抗生素 CO2 作物脱毒 单倍体育种 二、植物体细胞杂交和动物细胞融合 1.若该图为植物体细胞杂交示意图: (1)原生质体的制备:A、B细胞应用酶解法去除_______。这种 酶是_________________,由此生成的A细胞和B细胞称为原生质 体。 细胞壁 纤维素酶和果胶酶 (2)促融方法:①过程中,常用的化学试剂是_________。 (3)新细胞壁的形成:②过程形成的D细胞具有一定的形状,该 过程与细胞中的_________密切相关。 (4)杂种植株的培育:利用③_____________技术培养杂种植株 依据的原理是_____________,所得杂种植株_____(“可育”或 “不可育”)。 聚乙二醇 高尔基体 植物组织培养 细胞的全能性 可育 2.若该图为动物细胞融合示意图: (1)促融方法:与植物体细胞杂交相比,①过程中特有的方法 是_________处理。 (2)原理:①过程的完成依赖于_______________。 (3)应用:若A细胞为骨髓瘤细胞,B细胞为效应B细胞,那么D细 胞称为_______细胞,由D细胞连续分裂产生大量细胞的过程,称 为_____。这种细胞既能无限繁殖,又能产生_________。 灭活病毒 细胞膜的流动性 杂交瘤 克隆 单一抗体 3.若该图为体细胞核移植过程示意图,假设C细胞的细胞核来自 于A细胞: (1)受体细胞(B细胞)的选择理由: 第一:营养物质丰富,能满足早期胚胎发育的需要; 第二:体积较大,易于操作; 第三:含有使已分化的细胞核恢复分裂能力的物质。 (2)克隆动物的性状:通过该过程克隆的动物主要性状由______ 决定。 A细胞 1.(2013浙江高考·T6B)实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程中, 对皮肤组织可用胰蛋白酶消化。( ) 分析:动物细胞培养过程中,用胰蛋白酶消化组织,使其分散为 单个细胞,便于培养。 2.(2012广东高考·T2A)培养草莓脱毒苗所采用的主要技术是 组织培养。( ) 分析:植物的茎尖一般没有病毒感染,因此可以通过组织培养 技术培养茎尖细胞以获得脱毒苗。 √ √ 3.(2011江苏高考·T14B)体细胞杂交技术可用于克隆动物和 制备单克隆抗体。( ) 分析:克隆动物通过核移植技术获得,不能通过体细胞杂交技 术获得。 4.(2010江苏高考·T24C)大规模栽培组织培养苗,获取药用成 分。( ) 分析:植物组织培养技术可以不受季节限制,通过大量培养试 管苗实现快速繁殖,可获取药用成分。 × √ 5.(2010浙江高考·T4A)培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁 上可形成多层细胞
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