21.1-免疫缺陷病及其免疫检验要点.ppt

抗体检测：血液（清）、尿液、唾液 抗原检测：血清（浆） 核酸检测：血清（浆） 病毒分离：血液，脑脊液，性分泌液 CD4细胞检测：血液 病毒载量测定：血清（浆） 检测标本种类 （一）HIV抗原检测 常用ELISA法检测HIV的核心抗原P24。 P24出现于急性感染期和AIDS晚期，其定量检测可作为早期或晚期病毒量的间接指标。 在潜伏期，P24检测常为阴性。 （二）HIV抗体检测 HIV感染后2～3月可出现抗体，并可持续终身，此为艾滋病的常规检测指标。 初筛试验： ELISA法 　胶乳凝集法 　免疫金层析法 确认试验： 免疫印迹法 初筛查最基本，最可靠的手段 ELISA试剂敏感性和特异性越来越高 与抗原检测同时进行 ELISA法检测HIV抗体 常用的方法有免疫斑点法、免疫层析法、硒标记法、金标记法和凝集试验等。 HIV抗体快速检测 OraQuick test （1）便于操作，大部分快速检测试剂均为一步法，只需在样品孔中按要求滴上样品后在规定的时间内观察结果即可。 （2）反应时间短，一般为15～60分钟，大部分试剂的反应时间为30分钟。 （3）可以目测，不需要特殊的仪器设备。 HIV快速检测法的优点 （5）试剂可在室温条件下保存， 如雅培HIV-1/2抗体诊断试剂在30℃ 储存12个月后的试剂敏感性与储存与 2~8℃的试剂敏感性相同。 （4）技术要求不高。方法简单，受训的技术员都可操作。 确认试剂必须经国家食品药品监督管理局注册批准。 HIV抗体确认试验 确认试验可使用免疫印迹法、条带免疫法及免疫荧光法。目前以免疫印迹法（WB试验）最为常用。 HIV抗体确认试验判断标准 ①HIV抗体阳性：至少有两条膜带（gp41/ gp120/ gp160）或至少一条膜带与p24带同时出现； ②HIV抗体阴性：无HIV抗体特异性条带出现； ③HIV抗体可疑：出现HIV特异性条带，但带型不足以确认阳性者。 （三）CD4+T细胞计数 CD4+T细胞计数是反映HIV感染患者免疫系统损害状态的最明确指标。 美国疾病控制中心将CD4+T细胞计数作为艾滋病临床分期和判断预后的重要依据。 当CD4+T细胞低于500/μl，则易机会性感染；低于200/μl，则发生AIDS。 感染后4-11天病毒RNA检测方法：NASBA,　RT-PCR,　b-DNA （四）病毒RNA检测 在高度怀疑有原发感染时，且经抗体检测之后抗体检测阴性或不确定，有高危行为史或暴露史，特别是伴有相应的临床表现时，用核酸检测进行辅助诊断。 核酸检测有假阳性，特别是检测值较低时诊断应特别谨慎，一般在急性感染时血浆病毒载量在102～105，最高可达106，但病毒载量50000则感染的可能性极高。 目前，美国FDA还没有批准将核酸检测作为诊断指标，只用于治疗观察和评价。 1．什么是免疫缺陷病？ 2．免疫缺陷病分几类？ 3．免疫缺陷病的特征有哪些？ 4．什么是原发性B细胞缺陷病？其基本特征和代表性疾病有哪些？ 5．什么是原发性T细胞缺陷病？其基本特征和代表性疾病有哪些？ 6．什么是重症联合免疫缺陷病？其基本特征和代表性疾病有哪些？ 7．什么是原发性吞噬细胞缺陷病？其基本特征和代表性疾病有哪些？ 8．什么是继发性免疫缺陷病？最常见诱因有哪些？ 9．什么是获得性免疫缺陷综合征？其免疫学特点及临床特征有哪些？ 10．各种免疫缺陷病的主要免疫学检测方法有哪些？ 思考题 免疫缺陷病是免疫系统先天发育不全或后天损伤所致的疾病，分为原发性免疫缺陷性疾病和继发性免疫缺陷病两大类。 免疫缺陷病主要临床表现有反复感染；高发恶性肿瘤和自身免疫病；有一定遗传倾向。 AIDS是最常见的继发性免疫缺陷病。HIV主要侵犯CD4+T细胞以及表达CD4分子的巨噬细胞等 ，通过直接或间接途径损伤受感染的CD4+细胞。 gp120 、gp41 在其致病中发挥重要作用。 免疫缺陷病检验主要涉及体液免疫、细胞免疫、补体和吞噬细胞等方面的数量和功能检测，其中AIDS实验室检测包括HIV抗原和抗体、CD4+T细胞计数等内容。 小 结 第三节 继发性免疫缺陷病 继发性免疫缺陷病（secondary immunodeficiency disease, SIDD）是后天因素造成的，继发于某些疾病或使用药物后所致的免疫系统暂时或持久损害的一类免疫缺陷性疾病。 分为继发性T细胞功能缺陷、继发性低丙种球蛋白血症、继发性吞噬细胞功能缺陷和补体缺陷。 1．肿瘤：恶性肿瘤，加之放疗、化疗、营养不良、消耗 等因素可导致免疫缺陷。 2．感染性疾病：以HIV感染所致的艾滋病最为严重。 3．遗传性疾病：染色体异常、酶缺乏、血红蛋白病等。 4．营养不良 5．免疫抑制疗法 6．其它：如电离辐射、手术、创伤、脾切