- 1、本文档共102页,可阅读全部内容。
- 2、有哪些信誉好的足球投注网站(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
* 盐酸表柔比星 三甲基硅烷柱 注射用盐酸表柔比星 注射用头孢他定 二羟基丙基硅烷键合硅胶柱 度米芬滴丸 苯乙烯-二乙烯基柱 胰激肽原酶 凝胶柱(测纯度) * 电泳淌度是单位场强下离子的平均电泳速度。因为电泳速度与外加电场强度有关,所以,在电泳中常用淌度而不用速度来描述荷电离子的电泳行为和特性。 在电场的作用下,依据各组分之间淌度的不同实现分离的方法。分离程度取决于淌度之差。 一、基本原理: 电泳迁移速度 电泳淌度 电场强度 影响电泳分离的条件: 1、缓冲液的PH值和离子强度 2、电场强度 3、样品浓度 二、各类电泳法: (1)、纸电泳法 (2)、醋酸纤维素电泳法:主要用于测定蛋白质相对百分含量 (3)、琼脂糖凝胶电泳法 (4)、聚丙烯酰胺凝胶电泳法 (5)、SDS聚丙烯胺凝胶电泳法:测定蛋白质的分子量 * 照毛细管电泳法(附录 V G)测定,使用熔融石英毛细管为分离柱(75μm×60cm,有效长度50cm),以120mmol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH2.5)为电极液,检测波长为214nm,毛细管温度为30℃,分离电压为12KV。 (5)色谱与电泳分离模式的结合。 (3)中性分子在胶束相和溶液(水相)间分配,疏水性强的组分与胶束结合的较牢,流出时间长; (4)可用来分离中性物质,扩展了高效毛细管电泳的应用范围; 加电渗流改性剂使电渗流反向,用于淌度很大的离子的分离,主要是无机阴离子的分离。负高压 。 加阳离子表面活性剂,如十六烷基三甲基溴化铵 电渗流 Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ X- X- X- X- X- (-) 高压 (+) 地 4、 毛细管离子分析 三、 高效毛细管电泳仪器 清洗 记录 检测器 高压电源 毛细管 电解液 1、高压电源:产生0~30kV 稳定连续可调电压 2、进样系统 进样量:毛细管长度的1%-2%;纳升级、非常小; 进样端加压、出口端抽真空、虹吸进样 4、检测系统 商品仪器:UV-VIS;荧光 实验室:质谱,电分析 5、清洗系统 一般用负压法,NaOH洗液,减少吸附 3、毛细管柱:毛细管分离柱不涂敷任何固定液 四、 应用及前景 特点: A、分离效率高:?104理论塔板数,接近GC 空心管,无固定液,H = B/u;流型不同 B、 分离速度快:优于LC,接近GC C、进样量少:nL 应用: 药物分析:旋光异构体 生化分析:氨基酸衍生物、蛋白、DNA 弱点: 检测器绝对灵敏度高,但浓度灵敏度仅为10-6 乌司他丁 还原型SDS-聚丙烯酰胺凝胶,分子量 乌司他丁溶液 还原型SDS-聚丙烯酰胺凝胶,分子量 肝素钠乳膏 鉴别(琼脂糖电泳) 2010版药典二部采用电泳法的品种 2010版药典二部采用CE的品种 盐酸头孢吡肟 有关物质 注射用盐酸头孢吡肟 有关物质 抑肽酶 有关物质 注射用抑肽酶 有关物质 例:毛细管电泳(抑肽酶) sigma抑肽酶对照品毛细管电泳谱图 18.417分钟的是去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶, 18.617分钟的是去丙氨酸-抑肽酶, 18.829分钟的是抑肽酶峰 活塞型往复泵 ——液相色谱仪中使用最广泛的恒流泵 双活塞型往复泵 三、 色谱柱 柱长15~30cm,内径4~5mm 基质 (硅胶或高分子聚合物微球) 功能层(固定在基质表面对样品分子保留起实质作用的有机分子或功能团) 石英窗 接色谱柱 UV 光电 倍增管 废液 四、 检测系统 1、紫外检测器 微量吸收池,光程为2-10mm, 体积约为1~10 ?L 最小检测量10-9g·ml-1 对流量和温度波动不敏感 可用于梯度洗脱。 最常用的通用型检测器 四、 检测系统 光电二极管阵列检测器 时间、光强度和波长三维谱 2、荧光检测器 四、 检测系统 灵敏度高 选择性好 样品量很小 适合药物和生化样品分析 3、蒸发光散射检测器 四、 检测系统 适于无紫外吸收、无电活性和不发荧光的样品的检测 通用型和质量型检测器 光源 调零 光学零 参比 样品 平面镜 透镜 光电转换 记录仪 放大器 遮光板 溶剂相和样品+溶剂相对光的折射率不同,造成两束光强度差变化,差示信号放大记录代表样品浓度 通用型检测器,灵敏度为10-7g/ml 对温度变化敏感,且不适于梯度淋洗 4、示差折光检测器 四、 检测系统 接参比电极 和对电极 接色谱柱 Teflon 塑料块 1 cm 工作电极 (Pt, Au, 碳糊) 5、安培检测器 利用待测物在工作电极表面发生反应产生电流,此电流大小与待测物浓度成正比。 流动相必须含电解质,且呈化学隋性。 只
文档评论(0)