乳酸菌细菌素的制备分析报告.ppt

乳酸菌细菌素的制备 系部:制药系 专业:生物制药 组员:张婉月 徐洁 严梦迎 臧赢 陈孝颜 乳酸菌的介绍 乳酸菌（Lactobacillus）是发酵糖类且主要产物为乳酸的一类无芽孢、革兰氏染色阳性细菌的总称。凡是能从葡萄糖或乳糖的发酵过程中产生乳酸的细菌统称为乳酸菌。是一种存在于人类体内的益生菌。乳酸菌可用于制造酸奶、乳酪、德国酸菜、啤酒、葡萄酒、泡菜、腌渍食品和其他发酵食品。 乳酸菌小介绍 中文学名：乳酸菌 界：细菌界 门：厚壁菌门Firmicutes 纲：芽孢杆菌纲Bacilli 目：乳杆菌目Lactobacillales 科：乳杆菌科Lactobacillaceae 属：乳杆菌属Lactobacillus 代谢类型：异养厌氧型 形态特征 乳酸链球菌族，菌体球状，通常成对或成链。 生理功能 ?1．防治有些人种普遍患有的乳糖不耐症（喝鲜奶时出现的腹胀、腹泻等症状）。 ?2．促进蛋白质、单糖及钙、镁等营养物质的吸收，产生维生素B族等大量有益物质。 ?3．增加加肠道有益菌群，改善人体胃肠道功能，恢复人体肠道内菌群平衡，形成抗菌生物屏障，维护人体健康。 ?4、抑制腐败菌的繁殖，消解腐败菌产生的毒素，清除肠道垃圾。 生理功能 5．抑制胆固醇吸收，降血脂、降血压作用。 6．免疫调节作用，增强人体免疫力和抵抗力。 7．抗肿瘤、预防癌症作用。 8．提高SOD酶活力，消除人体自由基，具抗衰老、延年益寿作用。 9．有效预防女性泌尿生殖系统细菌感染。 10．控制人体内毒素水平，保护肝脏并增强肝脏的解毒、排毒功能。? 生活习性 繁殖：在固体培养基上菌落较小，生长缓慢。在液体发酵培养基内可以很快地生长，离心洗涤可以获得纯度较高的菌体且兼具需氧和厌氧的性能。 运动：大多数不运动，少数以周毛运动。 活性：普通的乳酸菌，活力极弱，它们只能在相对受限制的环境中存活，一旦脱离这些环境，其自身也会灭亡。只有经过特殊工艺处理的乳酸菌才能到达肠道。进入肠内的乳酸菌，必须具备数量多、活力强，才能发挥其生物功效 类型 乳酸菌大体上可分为两大类： 1） 动物源乳酸菌 2）植物源乳酸菌 因为取自植物易被人体吸收，不论摄取多大的量，人体不会产生异体蛋白排斥反应，且植物源乳酸菌比动物源者更具有活力，能比动物源多8倍的数量到达人体小肠内定植，从而发挥其强大而稳定的生物功效。 作用机理 乳酸菌在动物体内能发挥许多的生理功能。乳酸菌能促进动物生长，调节胃肠道正常菌群、维持微生态平衡，从向改善胃肠道功能；提高食物消化率和生物效价；降低血清胆固醇，控制内毒素；抑制肠道内腐败菌生长：提高机体免疫力等 工业应用 食品生产 常用于制造酸奶、乳酪、德国酸菜、啤酒、葡萄酒、泡菜、腌渍食品和其他发酵食品。在牛奶中加入乳酸菌可提高牛奶保健作用。 经乳酸菌发酵的乳酸菌奶酪蛋白及乳脂被转化为短肽、氨基酸和小分子的游离脂类等更易被人体吸收的小分子。奶中丰富的乳糖已被分解成乳酸，乳酸与钙结合形成乳酸钙，极易被人体吸收，也可被乳糖不耐症人群选用。乳酸菌奶能促进胃液分泌，促进消化，对胃具有保养功能，并能抑制肠道内腐败菌的生长，其生物保健价值远远高于牛奶。 乳酸菌冻干粉制作方案 材料? 菌种?：?乳酸菌? 培养基?：MRS培养基：蛋白胨10g、酵母膏5g、牛肉膏10g、葡萄糖20g、磷酸氢二钾2g、柠檬酸三氨1g、乙酸钠5g、硫酸镁0.8g、硫酸锰0.25g、吐温80?1ml、PH值6.2~6.4、用蒸馏水定容至1000ml，115-120℃灭菌30min。?????计数培养基：1LMRS培养基加入琼脂20g? 、 技术路线? 主要试剂和仪器 试剂? 奶粉、甘露醇、蛋白胨、酵母膏、牛肉膏、葡萄糖、磷酸氢二钾、柠檬酸三氨、乙酸钠、硫酸镁、硫酸锰、吐温、蒸馏水、生理盐水等。? 仪器? 高压灭菌锅、培养箱、无菌操作台、高速离心机、发酵罐、真空冷冻离心机、菌液瓶等? .具体实施方案 1乳杆菌活化? ????将实验室冰箱保藏的德氏乳杆菌用100ml灭菌的MRS液体培养基进行第一次活化，活化温度37?℃，24h后平板检测纯度和活菌数，检测达标后再将上述100ml菌液全部转入至400ml灭菌MRS液体培养基进行第二次活化，24h后平板检测纯度和活菌数，检测达标后转至40L发酵罐中进行扩大培养48h。 ?菌体收集? ??? 利用超速离心机对发酵后的菌液进行离心，在转速为4000-6000r/min的条件下离心10min，去上清收集沉积物。? 4菌泥冷冻干燥? ????将收集到的沉积物加入至复配保护剂，用振荡器混匀，制成菌悬液。再将其盛入冷冻平皿中，随后先置4℃冰箱平衡30min后，移入-30℃冰箱60min，然后置-80℃