荧光光谱仪的使用.ppt

This is a typical calibration curve from a fluorescence measurement. This is a DNA sample quantitated with Hoescht dye. LAST SLIDE FOR THE DAY. END DAY 1 1ST TOPIC DAY 2 - NUCLEIC ACID ANALYSIS This is a very simple spectrofluorometer. It has all the major components in the proper configuration. The excitation monochromator separates the light into individual wavelengths for exciting the sample and the emission monochromator separates the light coming from the sample before it reaches the detector. Without the emission monochromator, the detector would see a signal but have no correlation with wavelength. LAST SLIDE THIS TOPIC. NEXT TOPIC - 荧光 INSTRUMENTS. 荧光比吸收光谱法灵敏的多. 少量物质即可测定，例如在生命科学研究中就特别重要。 荧光分光光度计示意图 发射单色器 PM PM 分束器 光源 激发单色器 — —光闸 样品池 光源：氙灯、高压汞灯、激光； 样品池：石英（低荧光材料）； 两个单色器：选择激发光单色器； 分离荧光单色器； 两个检测器：光电倍增管。 主要部件 RF-5301PC光路图 仪器性能 高水平灵敏度：蒸馏水的拉曼峰S/N比为150以上 　　　　　　（EX350nm，狭逢5nm ） 狭逢10nm拉曼峰S/N＞600 利用先进的直流式长驱动机构，可及为迅速的得到理想的光谱 可进行高速光谱监控，最高扫描速度５５００ｎｍ／ｍｉｎ 波长范围：220-900nm及0次　 狭逢：1.5、3、5、10、15、20nm6档及激发6nm半高 波长精度：± 1.5nm　 波长扫描速度Survey,Super,VeryFast,Medium,Slow,Very Slow的7段转换；Survey,约5,500nm/min.Super约3,000nm/min. 仪器性能 功能强大、操作简便的软件系统 功能： 激发光谱、荧光、同时光谱测定 　　　　 定量分析（１－３次标准曲线） 　　　　 时间扫描—动力学 　　　　 只需打开　　　自动检索最佳激发光和荧光波长 从瑞利散射、拉曼散射及２次光中自动判断出荧光 使复杂的波长设置简单化 检索最佳的激发光和荧光波长 四则运算 数据变换（1-4介导数，倒数，对数） 曲线平滑 峰值检测 面积计算 活度值计算等 计算平均值 多样的数据处理 扩展功能和附件 大样品室可安装 各种样品池架 ＬＣ流动样品池 偏光装置等 丰富的任选附件： 单一恒温样品池（带搅拌器） 该部件在恒温状态下搅拌试样，进行测定，最适合浮游细胞的荧光测定。利用恒温水的循环，可使样品池恒温化。搅拌器的速度可调节 恒温水循环装置 使用温度范围：室温—85 0C温度调节精确度：+0.05 0C泵的流量：最大15L/18L/min(50/60Hz)容器的容量：约6.8L 恒温四连池架 利用恒温水的循环，一次可使4个样品池恒温化。 适用的温度范围：5 0C--80 0C 微量样品池装置 取400ul的少量试样就能测定。试样可以放入与四面研磨样品池大小（10mm)的槽中，安装在样品池架上进行测定。 测定偏光的辅助装置（用于紫外可见光或只用于可见光） 利用荧光偏光度的测定获得关于分子的大小、流动性及分子周围环境的信息。 高灵敏度池架 固体（粉末）样品架 固体、粉末样品，甚至样品池中的溶液也能用反射方式进行荧光测定。 高台样品架 LC流动样品池（12ul) 用于高速液相色谱分析的高灵敏度分光荧光监控。自由选择激发光波长和荧光波长，可进行有选择的检测。 LC流动样品池（120ul) 用于分析邻苯二酚胺。使用内容积120ul的散射光少的双面反射型石英微型的流动样品池。 光电倍增管 换用光电倍增管，可进行900nm以内的荧光光谱的测定。 直径8mm的试管架 可以安装试管 荧光应用领域—生命科学