BFRL-KNAUER系列高效液相色谱仪.ppt

高效液相色谱 概述 概论 高效液相色谱法发展史 高效液相色谱法在药物分析中的作用 高效液相色谱法与其他分离方法的比较 色谱类型 高效液相色谱法发展史 “色谱”这一术语是根据“chromatography”一次翻译而来 由俄国植物学家茨维特(Tsvet)于1903年分离植物色素的过程中首创 直到1931年库恩(Kohn)等人才用它分离了胡萝卜素，并开始应用 我国于50年代后期开展了这方面的工作，所用名称有色层法或层析法 最终于80年代全国统一用色谱法，包括TLC(薄层色谱),GC,HPLC 高效液相色谱(HPLC)的发展始于20世纪60年代中后期 70年代中后期微处理技术的应用提高了仪器的自动化水平和分析精度 80年代新一代色谱仪是智能色谱仪 目前HPLC已成为化学、药学、医学、生物化学、环保等学科领域中重要的分离、分析技术，是各种实际分析课题必不可少的工具 高效液相色谱法在药物分析中的作用 药品质量标准 在药物分析中，HPLC已成为对各类药物及其制剂进行鉴别、检查、杂质分离及含量测定的重要手段，以下以中国药典和美国药典为代表说明HPLC在药品质量标准中的作用。 药物分析研究方法 以我国分析试验室杂志中的药物分析综述统计分析，在20世纪90年代后，每两年有一篇药物分析综述，每篇综述了两年内国内杂志发表的有关药物分析的论文，见表 高效液相色谱法与其他分离方法的比较 色谱类型 在具体分析某一类化合物时，色谱条件的选择和确定，需了解色谱柱的保留机理。HPLC的一个主要特点是色谱类型种类多，能够使不同的化合物得到分离。为此，将最重要和最常见的色谱类型及保留机理列于以下表中。 关于色谱仪 北京北分瑞利集团色谱中心 泵的特点 具有冲洗脱气功能以及柱塞后冲洗功能 泵头可更换，应用于微量、分析、半制备色谱 陶瓷内芯，钛合金泵体可扩展为离子色谱及生化样品的分析 寿命长 卓越的流量精度和流速稳定性 K-1001高压输液泵 采用电子脉动抑制技术,液流无脉动 丰富的程序可用于梯度及外部事件的控制 定时唤醒功能 具有程序间的链接功能 K-1001高压输液泵的特点 分析型泵的流速精度及流量稳定性比较 K-1001 0.5% 0.1% Dionex P580 LPG 0.1% ? Shimadzu LC-10TVP 2.0% 0.3% HP 1100 2.0% 0.3% Waters 600E 0.5% 0.1% Spectra System 1.0% 0.2% 紫外检测器的特点 流通池可更换，可用于微量、分析及半制备色谱 用于有害环境的光纤传输 用于测试波长精度的氧化钬滤光片选配件 开放的接口协议 可进行停流扫描 K-2600快速扫描紫外分光检测器 具有在线扫描功能 可进行波长的编程控制 可进行馏分收集的控制 可进行峰纯度检测 单机模式可同时输出两路信号 K-2600紫外分光检测器特点 控制模式： 独立模式、外部模拟控制或工作站软件反控 检测方式： 独立模式下同时使用两个波长检测 反控模式下同时使用四个波长检测 扫描功能： 在线扫描 程序功能： 30个程序 01#~20#通用程序，99行/程序 21#~29#链接程序 30#唤醒程序(常用于灯的开启及预热) 可对检测波长及扫描等进行编程 可对外部事件进行编程(如馏分收集等) 灯源： 氘灯或钨灯 GLP记录 模/数转换器内置 K-2600紫外分光检测器噪声及漂移比较 K-2600 ± 10.0 μAU 500 μAU/h Dionex UVD 1705 ± 50.0 μAU 500 μAU/h Shimadzu LC-10 AVP ± 5.0 μAU 200 μAU/h Waters 2487 DUAL ± 3.5 μAU 100 μAU/h Biotek ± 12.0 μAU 300 μAU/h [HP 1100 (Multi) ± 8.0 μAU 2000 μAU/h] 二极管阵列检测器的特点 DAD检测器的参数 1024 个二极管 氘灯: 190-740 nm 钨灯: 400-1020 nm 三维色谱图 二维及三维谱图 峰纯度, 光谱存储 DAD的噪声和漂移比较 K-2800 ± 10 μAU 300 μAU/h [K-2700] ± 30 μAU 1000 μAU/h Dionex PDA-100 ± 10 μAU 500 μAU/h Shimadzu LC-10