(生物选修一)菊花组织培养资料.ppt

专题3 植物组织培养技术 课题1：菊花的组织培养 基础知识 (一)、植物的组织培养的基本过程 1.理论基础：:植物细胞具有全能性 (1)概念： 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性 (2)原因： 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因 2.植物组织培养的过程： 离体的植物组织或细胞（又叫外植体） 愈伤组织 胚状体、 丛芽等 新个体 脱分化 再分化 生长 细胞分化：在个体发育中，相同细胞的后代在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程 。 愈伤组织：是通过细胞分裂形成的，其细胞排列疏松而无规则，高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞 脱分化(或者叫去分化)：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程 再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官 外植体:从活植物体上切下进行培养的那部分细胞、组织或器官 3.几个相关的概念 巩固练习： 下图是植物组织培养的简略表示。据此回答： （1）①表示__________________，它能被培养成为④的根本原因是______________。 （2）②表示____________，它与①相比分化程度__________，全能性_______。 ④ ① 脱分化 ② 再分化 ③ 离体的植物组织或器官 植物细胞具有全能性 愈伤组织 低 高 1.材料 植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响实验结果。 菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝作材料。 (二)、影响植物组织培养的因素. 〖思考〗一般来说，容易进行____繁殖的植物容易进行组织培养。 〖思考〗选取生长旺盛嫩枝进行组培的原因? 无性 嫩枝生理状态好，容易诱导脱分化和再分化 2.营养 ——常用的培养基是MS培养基 成分： 大量元素: 如N、P、K、Ca、Mg、S； 微量元素: 如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co； 有机物: 如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素，以及蔗糖等。 ①常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉素 生长素类： 2，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA） 细胞分裂素类： 激动素（KT）、6－苄基嘌呤（ 6－BA）、玉米素（ZT） 赤霉素类： 赤霉酸（GA3） （3)激素 生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素。 ②使用的先后顺序: 使用顺序 实验结果 先使用生长素，后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂但不分化 先使用细胞分裂素，后使用生长素 细胞既分裂又分化 同时使用 分化频率提高 生长素用量比细胞分裂素用量 植物细胞的发育方向 比值高时 使根分化、抑芽形成 比值低时 使芽分化、抑根形成 比值适中时 促进愈伤组织的形成 4.环境条件： pH、温度、光照等 菊花组培所需PH为5.8，温度为18-22℃， 每日用日光灯照射12h ③用量的比例: （1）MS培养基中各种营养物质有何作用？ 微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐； 蔗糖提供碳源，维持细胞的渗透压； 甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。 讨论： （2）同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？ 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。 (3)生长素比细胞分裂素比值低时 , 则 ( ) 。 A.有利于根的分化 , 抑制芽的形成 B. 有利于芽的分化 , 抑制根的形成 C. 促进愈伤组织形成 D. 促进根和芽的分化 B 实验操作 1.制备MS固体培养基 2.外植体消毒 （70％酒精、氯化汞、无菌水、无菌吸水纸） 3.接种（步骤） 4.培养（条件） 5.移栽 6.栽培 ［思考］你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？ 每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。 ［思考］外植体在培养过程中可能会被污染，你认为造成污染的原因有哪些？ 外植体消毒不彻底；培养基灭菌不彻底；接种中被杂菌污染；锥形瓶密封性差等。 ［思考］在此消毒过程中，是不是强度越大越好，为什么？ 不是。对外植体进行表面消毒时，既要考虑到药剂的消毒效果，又要考虑到植物的耐受力。 结果分析与评价 定期观