水微生物学摘要.ppt

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* * * * * * 采样用玻璃样品瓶在160~170℃烘箱中干燥灭菌或121℃高压蒸气灭菌锅中灭菌15min;塑料样品瓶用0.5%过氧乙酸灭菌备用。 用专用采样器采样时,将样品瓶固定于采集装置上,放入水中,到达预定深度后,打开瓶塞,待水样装满后,盖上瓶塞,再将采样装置提出水面。 表层水样徒手采集时,用手握住样品瓶底部,将瓶迅速浸入水面下10~15cm 处,然后将瓶口转向水流方向,待水样充满至瓶体积2/3 时,在水中加上瓶盖,取出水面。 采集自来水水样时,先用酒精灯或煤气灯将水龙头烧灼消毒,然后将水龙头完全打开,放水5~10分钟,排除管道内的贮存水后采水样。经常使用的水龙头放水1~3 分钟即可采集水样。采水量为瓶容量的80%左右,以便在检验时可充分摇动混匀水样。收集含余氯的水样时,则采样瓶未灭菌前按每采500ml水样加入1.5%硫代硫酸钠溶液2ml的量预先加入采样瓶内,然后在101.3kPa下高压灭菌20分钟,用于采样后中和水样中的余氯,终止余氯的后续杀菌作用。 取江、河、湖、水库等水源水样时,应选择有代表性的地点及水质可疑的地方,一般应在距水面10~15cm深处取样。采具有抽水设备的井水,先抽水约5分钟,除去管线中贮留的水。 采得水样后应立即记录水样名称、地点、时间等项目,应从速检验,一般从采集到检验不应超过2小时,条件不允许立即检验时,应存于冰箱,但不应超过4小时。 * * * 由于人工培养基和培养条件与自然条件不同、所获结果也不能直接说明该水样中病原微生物情况,但苗落总数的测定具有相对的卫生学意义。主要作为判断水质被污染程度的标志之一,但不能说明污染的来源。必须结合大肠菌群数来判断水污染的来源和安全程度。 * * 粪大肠菌群是总大肠菌群中的一部分,主要来自粪便。用提高培养温度的方法,造成不利于来自自然环境的大肠菌群生长的条件,使培养出来的菌主要为来自粪便中的大肠菌群,从而更准确地反映出水质受粪便污染的情况。 G- 无芽孢杆菌,包括四个菌属:埃希杆菌属、枸橼酸杆菌属、肠杆菌属、克雷伯杆菌属。 经水传播传染病主要为肠道传染病,大肠菌群主要来源于人畜粪便,在生活饮用水的安全检测中,常采用大肠菌群作为粪便污染指标,而不直接检测肠道致病菌。 * 4.1水样接种量 将水样充分混匀后,根据水样污染的程度确定水样接种量。每个样品至少用三个不同的水样量接种。同一接种水样量要有五管。 相对未受污染的水样接种量为10mL、1mL、0.1mL。受污染水样接种量根据污染程度接种1mL、0.1mL、0.01mL或0.1mL、0.01mL、0.001mL等。 如接种体积为10mL,则试管内应装有三倍浓度乳糖蛋白胨培养液5mL;如接种量为1mL或少于1mL,则可接种于普通浓度的乳糖蛋白胨培养液10mL中。 4.2初发酵试验 将水样分别接种到盛有乳糖蛋白胨培养液的发酵管中。在37℃±0.5℃下培养24h±2h。产酸和产气的发酵管表明试验阳性。如在倒管内产气不明显,可轻拍试管,有小气泡升起的为阳性。 4.3复发酵试验 轻微振荡初发酵试验阳性结果的发酵管,用3mm接种环或灭菌棒将培养物转接到EC培养液中。在44.5℃±0.5℃温度下培养24h±2h(水浴箱的水面应高于试管中培养基液面)。接种后所有发酵管必须在30min内放进水浴中。培养后立即观察,发酵管产气则证实为粪大肠菌群阳性。 多管发酵法是以最可能数(most probable number)简称MPN来表示试验结果的。根据证实为大肠菌群阳性的管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)大肠菌群的MPN值。 * * * * 正常情况下,由于温度和玫瑰酸盐试剂的选择性作用,在M-FC培养基上很少见到非粪大肠菌菌落。必要时可将可疑菌落接种于EC培养液,44.5℃±0.5℃培养24h±2h,如产气则证实为粪大肠菌群。 * * * 4.大肠埃希氏菌 人和动物的粪便中大量存在 少数几种能引起人类食物中毒 检出大肠埃希氏菌→直接或间接地被粪便污染 大肠埃希氏菌在外界存活时间≈主要肠道病原菌 出现→预示着某些肠道病原菌(沙门氏菌、志贺氏菌)的存在→国际上公认的卫生监测指示菌。 * 四. 主要技术指标 自动鉴鉴定定细菌,分析药敏,给出提示性用药报告。 五. 仪器特点 本仪器能自动吸样,将菌液吸入所需鉴定板或药敏板的各反应孔,每小时计数器扫描一次,记录各孔中的变化情况,通过软件分析其生化特性或在一定抗生素浓度下的生长状况,鉴定细菌种类和测定MIC,并给出提示性用药报告。 * * * * 病毒的生物学特性,即其外层为蛋白质外壳,具有COO-及NH3+基团,具有一定的吸附作用,可以通过调节PH值而促进其吸附或释放 浓集病毒的方法有:滤膜、硅藻土或玻璃粉吸附、可沉淀盐类、氧化铁及聚电解质的吸附和沉淀、

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