0424特种蛋白课件—樊英俊摘要.ppt

图4： BN- II ② BN II的测定方法：终点散射比浊法（固定时间测量法） ③ 标准品与定标曲线及使用的公式 Ig标准品可溯源CRM470， 采用六点定标， 用Logit-log回归曲线， Logit-log回归曲线 Logit-log计算浓度 ④ 测量范围与可测量范围 ⑤ BN II的抗原过剩检测原理 预反应检测抗原过剩: BN II只有三个项目(IgM,AFP,以及IgA)可运用预反应原理(Pre-reaction) 进行抗原过量检查。 抗原过量检查见图6 BN II的抗原过剩检测 IgM为例说明BN II的抗原过量检测原理 因此BN II在检测IgA和IgM时，能将抗原过剩的风险降到最低！ 但是， BN II的抗原过量不能完全消除，在极少数情况下，非常高的免疫球蛋白浓度可能会产生错误的低结果。尤其是单克隆免疫球蛋白可能会显示与多克隆标准品不同的反应，在个别情况下，这可能会导致结果降低的假象或导致非线性结果。 ⑥BN II的非特异性反应检测方式： 两种选择方式 BN II对所有样本进行非特异性反应鉴别的两种选择方式： 非特意性反应1 非特异性反应2。 3.2.3、速率散射比浊法： 速率散射比浊法：以BECKMAN IMMAGE为例 ① IMMAGE的光学系统： 激光光源, 波长670nm, 90度 检测角检测Ig ② 标准品与定标曲线及使用的公式： Ig标准品可溯源CRM470， 采用单点校正定标， 内置多点定标曲线（用Logit-log回归曲线）， ③ 测量范围：全程自动测定 因进行真正的抗原过量检测,能测定所有病理浓度的样本 ④ 抗原过量检测 进行真正的抗原过量检测。 这项检测不会影响用来计算样本结果的速率峰信号。 下面以IgM检测为例说明这个原理。 IMMAGE检测IgM抗原过剩 IgM抗原过量检测原理 第一步：在抗原抗体反应过程中得到速率峰值之后，再加入一定浓度的已知抗原，假设进行反应的第一步骤时存在过量的抗体，则额外的抗原溶液会同这些“剩余”的抗体再一次反应，并形成一个新的速率峰，证明在原来反应期间从原有速率峰计算而来的样本结果是可信的。 如果在进行第一步时抗原过量，则添加额外抗原不会引起新的免疫沉淀反应，不会出现新的速率峰。在这种情况下，样本会进一步自动稀释并重新分析，直到得到最终可信结果。 ⑤ 非特异性反应检测 IMMAGE有两种方式: 方式1 方式2 ? 在反应开始的 90 秒内，每隔 5 秒钟就记录一次，每次记录中进行 200 次读数 , 合 计共 3600 次读数。记录特异的信号变化，排除因污染颗粒、气泡及非特异性沉 淀物引起的干扰性信号，提高了准确度。 待测物质浓度 速率峰 1 2 3 4 5 速率峰与待测物质的示意图 方式1 全程动力学空白对照 ? 设立一个 独立的空白对照杯 ，全程跟踪反应过程 , 自动减去空白对照杯中得到 的信号，全面排除本底噪音，特别是在测定低稀释度的样本时，更能确保检 测结果的可靠性 反应杯信号 特异性信号 对照杯信号 方式 2 Immage 系统采用空白样本对照，不加入抗体，在另一个比色管中自动检测非特异性反应。用反应比色管中得到的相应散射信号自动减去从样本空白对照比色管中得到的信号。这种处理方法，用速率峰来计算结果就不会受到干扰信号的影响。 4、样本自身特性对结果的影响 ① 样本与标准品Ig类型的不均一性和Ig分子大小的不均一性影响检测结果。 ② 样本与标准液中Ig各亚类比例相差过大影响检测结果。 ③ 免疫球蛋白异常： a 多发性骨骨髓瘤， b 巨球蛋白血症 c 重链病 免疫球蛋白异常：一方面因浓度过高出现抗原过剩，另一方面因Ig抗原性的改变影响测定结果！ ④、适宜的样本类型： 适用的样本为：人血清、肝素化血浆或 EDTA 血浆，要尽可能新鲜冷冻样本在溶化后无浑浊，不能反复冻溶。 尿液和脑脊液样本：尿液和脑脊液样本在测试前必须经过离心沉淀。尿液样本不能冷冻 稀释后的样本必须在 4 小时之内测定。 ⑤、溶血、黄疸和甘油三酯的影响 溶血的影响 甘油三酯的影响 黄疸的影响 ⑥、样本中类风湿因子的干扰 5、实验室条件和操作人员技能 由于测定方法，试剂，仪器和操作人员不同，即各实验室条件不同，会影响测定结果，因此各实验室应建立自己实验室的正常参考值范围。 “检 验 质 量” 是检验工作者永恒的主题 谢 养 了 谢