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山东农业大学动物生理学教研室 实验六 家兔呼吸运动的调节 实验目的 掌握 家兔耳缘静脉注射法;家兔颈部手术操作、神经血管分离、气管插管技术;记录家兔呼吸曲线 观察 血液中化学因素(CO2,O2和[H+])及药物对呼吸运动的影响;迷走神经对呼吸运动的调节. 了解 各种因素影响呼吸运动的机制 实验原理 呼吸运动是受呼吸中枢控制的呼吸肌节律性活动,伴随着压力变化而使气体进出呼吸道。 呼吸运动受神经以及血液中PO2,PCO2,[H+]等因素的调节。 药物能作用于呼吸中枢而影响呼吸运动。 肺牵张反射的传入神经是迷走神经,通过此反射弧完成正常地节律性呼吸。 实 验 材 料 1、动 物:家兔 2、器 械:动物手术器材(手术刀、手术剪、止血钳、玻璃分针,动脉夹,丝线,注射器,兔手术台),气管插管,橡皮管(长1 m以上,短10-20 cm),体重秤,呼吸换能器(或张力换能器),生物信号处理系统等。 3、药品和试剂:20%乌拉坦、3%乳酸、生理盐水等。 实 验 方 法 一、仪器连接与标定 二、称重、麻醉 三、固 定、剪 毛 四、颈 部 手 术 五、气 管 插 管 六、分离迷走神经 七、腹部手术 八、项 目 观 察 1、仪器的连接与标定 换能器和微机记录系统的信号输入通道连接,刺激电极与刺激输出通道连接. 设定记录呼吸运动的参数. 水 压 计--呼吸通道定标(已定标). 捉拿:实验家兔多数饲养在笼内,所以抓取较为方便,一般以右手抓住兔颈部的毛皮提起,然后左手托其臀部或腹部,让其体重重量的大部分集中在左手上,这样就避免了抓取过程中的动物损伤。不能采用抓双耳或抓提腹部。——1、2、3均为不正确的抓取方法(1.可损伤两肾,2.可造成皮下出血,3.可伤两耳),4、5为正确的抓取方法。颈后部的皮厚可以抓,并用手托兔体。 2、捉拿、称重、麻 醉 称重、麻 醉 麻醉 兔耳缘静脉注射:20%氨基甲酸乙酯 (1)注射液剂量 5 ml/kg体重,根据动物状态调整剂量,每次增加10%左右。 抽吸麻醉液时先取下针头,多吸一部分,排出气泡。 (2)进针—注射姿势调整 选择耳缘静脉,用酒精刺激后血管较粗;按压住血管根部,血管鼓起再进针,比较容易。 从远心端开始;循序向根部移动,每次移动距离不要太大,以免注射不成功或加药时无法注射,左右耳。 针头扎进1/3至1/2,并用拇指固定住,以免兔挣扎时退出。 注射时推动液体先快后慢(前1/3快,后面慢慢推进) — 随时观察动物状态。 剩余麻醉液需回收。 兔耳缘静脉注射时的注意事项 麻醉前应正确选用麻醉药品、用药剂量及给药途径。 进行静脉麻醉时,先将总用药量的三分之一快速注入,使动物迅速渡过兴奋期,余下的三分之二量则应缓慢注射,并密切观察动物麻醉状态及反应,以便准确判断麻醉深度。 如麻醉较浅,动物出现挣扎或呼吸急促等,需补充麻醉药以维持适当的麻醉。一次补充药量不宜超过原总用药量的五分之一。 麻醉过程中,应随时保持呼吸道通畅,并注意保温。 进针姿势 麻醉效果的观察 呼吸:深慢而平稳; 角膜反射:明显迟钝; 肌张力:全身肌肉松弛; 皮肤夹捏反射消失。 3. 家兔固定和剪毛 固定用细绳—回收 固定头部要点: 门牙—拉直以使颈部挺起,便于手术。 剪 毛 剪刀贴住皮肤剪毛; 提起毛再剪,易剪破皮肤。 4. 颈部手术 颈部正中切口—分离软组织—暴露气管—钝性分离双侧迷走神经—各自穿2根丝线备用。 钝性分离气管,底下穿棉线备用。 气管倒T形切口,插入Y形气管插管,棉线固定。 手术刀割开皮肤 一手绷紧皮肤, 另一手用力一次性割开皮肤。 分离软组织 用剪刀、镊子分离出气管; 除净气管外表的结缔组织等; 棉花条清除气管内的淤血、粘液等 。 穿线备用 5.气管插管 气管插管术示意图-示气管切口 环状软骨下1cm ,做倒T型切口 气管插管术示意图-示固定插管 将三通管向肺方向插入,固定 6. 分离神经 由里向外翻出气管一侧组织——颈动脉鞘: 粗 — 迷走神经 中 — 交感神经 细 — 减压神经 神经分离示意图 神经分离示意图-示迷走神经 7、腹部手术 山东农业大学动物生理学教研室
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