人降钙素原(PCT)酶联免疫分析试剂盒产品说明书.doc

人降钙素原(PCT) 酶联免疫使用说明书Enzyme-linked Immunosorbent Assay Kit 【包装规格】 96人份/盒 【预期用途】 本试剂盒采用ELISA双抗体酶联免疫夹心法定量检测人血清、血浆及相关液体样本中降钙素原(PCT)含量适用于严重感染或脓毒血症的早期诊断；全身性感染与非细菌性炎症反应（如自身免疫性疾病）的鉴别诊断；全身性细菌性感染与病毒感染的鉴别诊断；全身性细菌/真菌感染与器官移植排斥和移植后病毒感染的鉴别诊断；作为高危患者（如ICU、器官移植术后或接受免疫抑制治疗的患者）感染性疾病的监测指标? 人降钙素原（PCT）是降钙素的前体物，无激素活性，其在健康人血清中水平极低，但在全身性细菌感染患者血清中含量迅速升高，感染后两个小时即可检测到，且持续时间长，其在血清中的水平与感染性疾病的严重程度呈正相关,经有效抗生素治疗后，PCT水平可迅速下降，而病毒感染、肿瘤、自身免疫性疾病、外伤（多创伤或手术创伤）、临床用药、慢性炎症以及局部感染者，PCT水平维持在正常范围内或者有轻度升高。因此，PCT是细菌感染所致重症全身性炎症反应的良好指标在全身性细菌感染和脓毒症辅助鉴别诊断、预后判断、疗效观察等方面有很高的临床价值。双抗体夹心法水平抗体抗体酶板稀释液标准g/L） 0.5 mL 1瓶 9 标准品稀释液本试剂盒适用于定量检测人血清、血浆及相关液体样本中降钙素原(PCT)含量。全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 g离心20分钟，取上清即可检测，-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。1000 g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。其它生物标本：1000 g离心20分钟，取上清即可检测，-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 置于室温（18～30℃）平衡30分钟。 应充分混匀，避免泡，可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。 样本采集和处理时应戴口罩和手套，避免汗液、唾液及其气溶胶污染样本。 样本检测前如需运输，建议运输时保持2-8℃（冰盒）或-20℃（干冰），不要超过上述保存期限。 ，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性 18～26℃）平衡15～30分钟。 从试剂盒中取出浓缩洗涤液，用新鲜的纯化水1：1稀释后加入洗板机的洗液瓶中。 样本准备 标准品的稀释：用标准品稀释液按照下图表将标准品稀释，制备1-5号标准样品。为保证结果的准确性，每次实验请配置新的标准品溶液。 1200 ng/L 5号标准品 150 μL的原倍标准品加入150 μL标准品稀释液 600 ng/L 4号标准品 150 μL的5号标准品加入150 μL标准品稀释液 300 ng/L 3号标准品 150 μL的4号标准品加入150 μL标准品稀释液 150 ng/L 2号标准品 150 μL的3号标准品加入150 μL标准品稀释液 75 ng/L 1号标准品 150 μL的2号标准品加入150 μL标准品稀释液 2、试验条件 在室温（18～26℃）严格按照试剂盒说明书进行操作。 3、操作步骤 取出所需的PCT抗体包被板反应条置于微孔架上（立即将剩余的微孔反应条放回铝箔袋中，并重新密封铝箔袋）。 分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50 μL，待测样品孔中先加样品稀释液40 μL，然后再加待测样品10 μL（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，置37℃恒温箱孵育30分钟。 小心揭掉封板膜，弃去孔内液体，洗涤液注满各孔、静置30秒，甩干，重复5次，拍干。或者利用洗板机洗涤：程序4个循环，每孔350 μL，洗涤后拍干。 加入酶结合物，每孔加入酶标试剂50 μL，空白孔除外，充分混匀，置37℃恒温箱孵育30分钟。 重复操作程序③ 加入显色剂A50 μL，再加入显色剂B50 μL，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 每孔加终止液每孔50 μL，充分混匀，终止反应。 以空白孔调0，用酶标仪依序测量各孔在450 nm波长的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。 再乘以，即为样的实际浓度。再乘以，即为的实际浓度。g/L -1200ng/L 【参考值（参考范围）】 健康人：500 ng/ ng/L的为阴性，对PCT含量在100~500 ng/L之间者，建议动态观察。对PCT含量大于1200 ng/L的样本，应准确稀释后重做，最后将测得的PCT含量乘稀释倍数即为该样本实际PCT含量。 【检验方法的局限性】 PCT的水平作为诊断、监测重症感染患者的常规指标，在病毒感染或非感染性炎症反应时，血PCT水平不升高或仅有轻度升高PCT