Ch抗原特异性的分子基础资料讲解.ppt

ICA-WYS (2)抗原性方案(Antigenicity) 抗原性刻度（Welling）各氨基酸用出现在抗原区频率描述, 此频率除以各氨基酸在所有蛋白质中的频率就可推出此刻度值 疏水性氨基酸残基对抗原表位形成亦有贡献 缺点:所用数据库有限,并且连续位点内的残基被认为是同等重要 ICA-WYS ICA-WYS (3)二级结构预测方案(Secondary structure) β转角为凸出结构,多出现在蛋白质抗原表面, 利于与抗体嵌合, 较可能成为抗原表位 α螺旋、β片层结构规则不易形变, 较难嵌合抗体,一般不作为抗原表位 预测成功率均不超过65%。Cohen方法对转角的预测正确率很高, 对于已知折叠类型的蛋白质(αα类, ββ类,α/β类) 正确率高达95% ICA-WYS ICA-WYS 2. 化学“切割”法或酶法 ① 化学法或酶“切割”抗原, 分离抗原肽段, 研究其与不同McAb的作用, 确定抗原表位 该法对蛋白质一级结构不作要求, 测定结果只能是抗原的线性表位 ICA-WYS ICA-WYS ②水解抗原-抗体复合物 直接确定线性及构象性抗原表位方法, 又称蛋白质足迹分析( Protein footprinting) 理论依据:抗原-抗体复合物结合部位能抵抗蛋白酶水解 采用质谱技术已成功确定细胞色素C , 胃泌素释放肽(GRP) , 脂碱性磷酸酶( PLAP) 等抗原表位 Lemmel C, Stevanovi? S. The use of HPLC-MS in T-cell epitope identification. Methods 29 (2003) 248 ~259 ICA-WYS 抗原结合价（antigenic valence ） 能和抗体分子结合的AD数目。半抗原为一价，天然抗原一般是大分子，由多种、多个AD组成，是多价抗原，可和多个抗体分子结合 + ICA-WYS 抗原结合价（抗原价） 指能与抗体分子结合的AD总数 分子量10万：2个抗原价 分子量40万：10~12个抗原价 一个含100个氨基酸的球型蛋白可能只有几个表面AD，因蛋白质空间折叠使大部分AD埋藏于分子内部 ICA-WYS ICA-WYS 交叉反应 Ag除与相应Ab发生特异性反应外，有时还可与其它Ab或Ag发生反应，称为交叉反应（cross reaction） 因两种AD在化学结构上有部分相似 肺炎荚膜多糖3型(S3)与8型 (S8)均含有纤维二糖醛酸残基结构，有一定相似性，故与马抗S3血清或马抗S8血清相遇时，两者均出现一定程度的交叉反应 ICA-WYS ICA-WYS 肺炎荚膜多糖S3 型与S8型的结构式： ICA-WYS S3 S8 纤维二糖醛酸残基 纤维二糖醛酸残基 纤维二糖醛酸残基 葡萄糖半乳糖残基 ICA-WYS 30 四、抗原结构的免疫化学 （一）蛋白质抗原 鲸肌红蛋白结构 1条153个氨基酸残基多肽链+1个血红素辅基 8个螺旋区（α-螺旋占75%） 肽链转弯处形成无规卷曲（α-螺旋不能转弯） AD处于肽链第16~ 21、56~62、94~99、113~ 119与146~151位氨基酸残基的各位点上 ICA-WYS ICA-WYS 图2-4 肌红蛋白的构象 ICA-WYS F8 E7 A B C D E F G H ICA-WYS 图2-5 鲸肌红蛋白的结构示意图 ICA-WYS 16~21 56~62 94~99 113~119 146~151 ICA-WYS ICA-WYS 表2-2 鲸肌红蛋白抗原决定簇位点的一级结构 决定簇位点 氨基酸残基及位置 残基数 15 16 21 22 1 (Ala)-Lys-Val-Glu-Ala-Asp-Val-(Ala) 6或7 56 62 2 Lys-Ala-Ser-Glu-Asp-Leu-Lys 7 94 99 3 Ala-Thr-Lys-His-Lys-Ile