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屏幕显示方式 Main Run Enter List Edit File Lid 运行已有程序 已有程序菜单 删除已有程序 新建反应程序 编辑已有程序 热盖关闭调节 Enter Enter abcdefghi# jklmnopqr# Name #stuvwxyz# In Use! .,-+/():=# Enter PCR1 Control Method BLOCK Sim-Tube 输入文件名,满8个字符自动生成程序名,不满8个字符时用#终止 BLOCK:屏幕显示样品台温度(样品台温控方式) Sim-Tube:屏幕显示反应液温度(模拟管温控方式) Enter PCR1 Segment #1 Hold Cycle END 选择预变性保温 循环内第一步温度和时间 Enter PCR1 Hold at 94C Hold for 5m0s 预变性温度和时间 Enter PCR1 Segment #2 Hold Cycle END 3 step PCR 循环参数设置 Step #1 94.0C Hold 0m30s 循环内步骤数 Step #1 Option？ No yes 不需要拓展功能 Step #2 55.0C Hold 0m40s 循环内第二步温度和时间 Step #2 Option？ No yes 不需要拓展功能 Step #3 72.0C Hold 0m30s 循环内第三步温度和时间 不需要拓展功能 设置循环数 后延伸保温 后延伸温度和时间 Step #3 Option？ No yes Total Cycle= 35 Segment #3 Hold Cycle END Hold at 72.0C Hold for 10m0s Segment #4 Hold Cycle END 选择反应完后保温 Hold at 4.0C Hold for 99m0s 设置反应完后的保温温度和时间 Segment #5 Hold Cycle END 终止参数设置 Enter PCR1 Estimated Run Time： 1h53m05s Save？ YES no 预计反应时间，程序是否保存 Lid LID Turn off heated Lid below 9C 当温度低于9度时，热盖自动关闭 Run PCR1 PCR2 RUN PCR1 Use heated lid? Yes No RUN PCR1 Vessel: 0.2TUBE 0.5tube plate RUN PCR1 Volume(Ul) 50 K RUN PCR1 Lid temperature: 19℃ 4.反应完成后,将反应液与凝胶电泳缓冲液按比例混匀,上样电泳。 三、操作步骤 人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。 * 生物化学实验技术 目 录 PCR的反应原理 PCR的类型和应用 PCR示例 多聚酶链式反应 （PCR：Polymerase Chain Reaction) Kary B. Mullis PCR是由美国科学家穆利斯提出的一种 体外简化条件下模拟DNA体内复制的DNA 快速扩增的方法，此技术获得1993年诺贝 尔化学奖。 体内DNA的复制体系 DNA聚合酶（I II III） 拓扑异构酶 解旋酶类 SSB 引物 dNTP Mg2+ 5’ 3’ Mullis的PCR构思 引物 引物 DNA聚合酶 DNA聚合酶 特定DNA片段 Taq DNA聚合酶（thermus aquaticus) 酶活性(%) 温度(℃) 40 50 60 70 80 90
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