化妆品的微生物学检查资料讲解.ppt

2.分离培养目的 经增殖培养后,被检菌大量繁殖，同时其他一些杂菌也出现增殖。因此分离培养能使目的菌从混合菌中分离出来。 3.纯培养目的 只是大量增殖被检菌，用于后面的进一步检验。 4.染色镜检目的 初步鉴定，观察细菌的形态大小。 5.生化试验目的 最终的鉴定依据，结合染色镜检得出实验结果，填写检验报告。 粪大肠菌群 粪大肠菌群系一群需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌，在44.5℃±0.5℃培养24h～48h 能发酵乳糖产酸并产气。 粪大肠菌群主要存在于温血动物粪便中，随粪便排出体外后可直接污染化妆品，若产品中检出该菌群，表明该产品受到粪便污染，可能存在肠道致病菌并引起疾病，是评价化妆品卫生质量的重要指标之一。 产酸：黄色 产气：气泡 双倍胆盐乳糖M EMB琼脂 液面玫瑰红色 紫黑色 靛基质试验 粪大肠菌群检查结果报告 根据发酵乳糖产酸产气，平板上有典型菌落，并经证实为革兰氏阴性短杆菌，靛基质试验阳性，则可报告被检样品中检出粪大肠菌群。 铜绿假单胞菌 铜绿假单胞菌属于假单胞菌属，为革兰氏阴性杆菌，氧化酶阳性，能产生绿脓菌素。此外还能液化明胶，还原硝酸盐为亚硝酸盐，在42℃±1℃条件下能生长。 铜绿假单胞菌在特殊情况下可引起皮肤化脓感染、泌尿道感染、中耳炎等。外伤及烧伤患者感染后最易引起化脓，并引起败血症。为保证消费者安全，化妆品中不得检出铜绿假单胞菌。 最终结果判断 增菌培养 供试液的制备 书写检验 记录单 分离纯化 无菌落或无特征菌落 配培养基和稀释液 革兰染色、镜检→ 氧化酶试验 绿脓菌素试验 生化试验 硝酸盐还原试验 42℃生长试验 明胶液化试验 SCDLP培养基 十六烷三甲基溴化铵琼脂 36±1℃ 18~24h 36±1℃ 18~24h 特征菌落 灰白色、扁平、周围有水溶性蓝绿色素 灰白色湿润 黄绿色菌膜 粉红/紫红色 十六烷三甲基溴化铵平板 SCDLP培养基 氧化酶试验 绿脓菌素试验 盐酸层呈粉紫色氯仿层呈蓝绿色 硝酸盐还原产气试验 明胶液化 明胶培养基（高层） 明胶液化试验 铜绿假单胞菌检查结果报告 被检样品经增菌分离培养后，经证实为革兰氏阴性杆菌，氧化酶及绿脓菌素试验皆为阳性者，即可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌；如绿脓菌素试验阴性而液化明胶、硝酸盐还原产气和42℃生长试验三者皆为阳性时，仍可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。 金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，呈葡萄状排列，无芽胞，无荚膜，能分解甘露醇，血浆凝固酶阳性。 金黄色葡萄球菌在外界分布较广，抵抗力也较强，能引起人体局部化脏性病灶，严重时可导致败血症，因此化妆品中检验金黄色葡萄球菌有重要意义。 革兰染色、镜检→ 生化试验:血浆凝固酶试验 甘露醇发酵试验 最终结果判断 增菌培养 供试品的处理 书写检验 记录单 分离纯化 无菌落或无特征菌落 配培养基和稀释液 36±1℃ 36±1℃ SCDLP培养基或7.5%NaCl肉汤 24±2h Baird Parker’s或血琼脂 24~48h 特征菌落 灰黑色、边缘有浑浊带、周围有透明带 金黄色葡萄球菌检查流程图 灰/黑色 Baird Parker’s平板 甘露醇发酵试验 血浆凝块 液态血浆 血浆凝固酶试验 金黄色葡萄球菌检查结果报告 凡在上述选择平板上有可疑菌落生长，经染色镜检，证明为革兰氏阳性葡萄球菌，并能发酵甘露醇产酸，血浆凝固酶试验阳性者，可报告被检样品检出金黄色葡萄球菌。 霉菌和酵母菌 霉菌和酵母菌数测定（Determination of molds and yeast count）是指化妆品检样在一定条件下培养后，1g 或1mL 化妆品中所污染的活的霉菌和酵母菌数量，藉以判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般卫生状况。 本方法根据霉菌和酵母菌特有的形态和培养特性，在虎红培养基上，置28℃±2℃培养72h，计算所生长的霉菌和酵母菌数。 操作步骤 样品稀释 同菌落总数测定 取1：10、1：100、1：1000 的检液各1mL 分别注入灭菌平皿内，每个稀释度各用2个平皿，注入融化并冷至45℃±1℃左右的虎红培养基，充分摇匀。凝固后，翻转平板，置28℃±1℃培养72h±2h，计数平板内生长的霉菌和酵母菌数。若有霉菌蔓延生长，为避免影响其它霉菌和酵母菌的计数时，于48h±2h 应及时将此平板取出计数。 计算方法：先点数每个平板上生长的霉菌和酵母菌菌落数，求出每个稀释度的平均菌落数。判定结果时，应选取菌落数在5 个～50 个范围之内的平皿计数，乘以稀释倍数后，即为每g（或每mL）检样中所含的霉