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三、来自植物的抗真菌病基因及其应用 1rs-afp基因 、来源于萝卜和拟南芥等四种植物,通过引起菌丝过度分枝或抑制菌丝顶端生长,对广泛的植物丝状病原真菌发挥抗性。1993,将其液剂喷在甜菜叶片上,对真菌?产生抗性。 2、番茄cf-2基因 来源于番茄,对Cladosporium产生抗性。 3 番茄cf-9基因 四、rip基因及其抗真菌病的应用 19世纪末第一个核糖体失活蛋白(RIP),又称蓖麻蛋白,目前50多种;实验表明RIP具有抗真菌、抗病毒和抗虫作用。 1、作用机理 核糖体灭活,但敏感性不同; 对自身核糖体的灭活 2、应用 大麦RIP导入烟草,抑制立枯病;玉米RIP转入水稻,抗真菌; 第三节 抗植物细菌病害基因及其应用 一、现状 细菌性病害300多种,我国60-70种;全球马铃薯因细菌病害减产25%,约合40亿。历史事件: 1845-1860 爱尔兰 马铃薯晚疫病 100万人饥饿,100万人从移民至北美。 1970 美国 玉米叶斑病 减产15%。 菌物病原复杂的遗传变异、寄生特性、侵染途径决定其多变的致病机制。 按基因来源分类 病原菌自身的抗性基因 抗菌肽基因 溶菌酶基因 病原相关蛋白基因 防御素基因 植物保卫素及合成酶基因 TLP蛋白基因 二、病原菌自身的抗性基因及其应用 1、作用机理 将病原菌的某一基因导入寄主植物细胞,使之对该病菌产生抗性。 2 基因种类1)Oct基因及tta基因及其应用 鸟氨酸氨甲酰基转移酶Oct基因:抑制植物鸟氨酸氨甲酰基转移酶的活性。实例:转基因烟草,不表现菜豆毒素,对照表现花叶退绿。 抗毒素tta的乙酰转移酶基因 2)抗菌肽基因 最早从天蚕里分离而来的抗菌化合物命名为杀菌肽,后来将所有具抗菌活性并与之高度同源性的化合物成为抗菌肽。 特点:广泛的抗菌谱 3)溶菌酶基因 作用机理:裂解某些细菌细胞壁的多糖组分来溶解细菌。1922,英国,细菌学家发现。 应用:从鸡蛋清里克隆基因,转入烟草,无效;将T4噬菌体的溶菌酶基因转入烟草,防治软腐病,防效达65%。 4)病原相关蛋白基因 A、PR蛋白基因及应用 病原相关蛋白(PR),在TMV侵染表现过敏反应的烟草中发现;具有体外抑制菌物生长的作用,只是抑菌谱不同。在转基因中PR超量表达能提高其对某些菌物的抗性。 B、番茄pto基因及应用 C、番茄pil基因及应用 5)防御素基因 作用机理:对菌物生长的抑制作用,ex在种子萌发时,防御素立即释放,保护幼苗。转胡萝卜防御素的烟草提高了对烟草赤星病的抗性。 种类:防御素np-1(从兔子免疫细胞中克隆) 美洲商陆Pa-afp 6)植物保卫素及其合成酶基因 A、化合物保卫素及合成酶基因 作用机理:保卫素是植物在一系列生物和非生物因子刺激下合成积累的一类具有抗微生物活性的低分子质量脂溶性化合物。 应用:花生中的stilbene合成酶基因转入烟草,表现出抗性。 B、活泼氧的抗菌功能及其调控基因 o21H2O2参与植物防卫反应。 7)TLP蛋白基因 来源:从单子叶和双子叶植物中分离出来的一类抗菌蛋白总称,其氨基酸序列与非洲浆果超甜味蛋白具有相似性,因此称Thumatin like protein。 机理:蛋白与菌物细胞膜结合,形成离子通道改变膜的透性使菌物致死。 应用:转基因马铃薯,抗性。 人有了知识,就会具备各种分析能力, 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书,广泛阅读, 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍,我们能丰富知识, 培养逻辑思维能力; 通过阅读文学作品,我们能提高文学鉴赏水平, 培养文学情趣; 通过阅读报刊,我们能增长见识,扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操, 给我们巨大的精神力量, 鼓舞我们前进。 * 二、病毒复制酶基因 抗病毒原理 应 用 特 点 病毒复制酶基因: 是病毒非结构蛋白基因。复制酶一般是在病毒核酸进入寄主细胞并结合到寄主核糖体之后形成。 1. 抗病毒机理 RNA转录体干扰病毒的复制。 病毒非结构蛋白基因介导抗性。 复制酶基因抑制病毒复制必须具备2个条件:1.具有一定空间构象。 2. 不完整性。 携有编码54kD蛋白基因的转基因烟草中检测不到54kD的蛋白产物,这说明很可能是其RNA转录体干扰了病毒的复制 TMV的编码126kD的完整基因导入植株后,植株却未获得抗性;而若插入1.4kD的核酸序列,使其基因失去功能,则能赋予植物抗性。 。 把TMV的RNA编码126kD蛋白的通读部分(readthrough)的54kD(包含病毒复制酶核心功能团)的基因导入烟草,转基因烟草对TMV表现出很高的抗性(接毒500μg/ml,植株不发病
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