第十章生物碱3.doc

授 课 对 象 系别 药学系 层次 高职 班级 教 学 方 式 讲授 讨论□ 示教□ 其他□ 课 程 类 型 理论课 实验课□ 见习课□ 其 他□ 题 目 生物碱的检识、提取与分离方法 课时安排 2学时 教 学 目 的 要 求 1、掌握生物碱检识方法。 2、掌握生物碱的提取方法。 3、熟悉生物碱的分离原理与方法。 4、掌握生物碱的单体分离。 教 学 内 容 重点（*） 难点（#） 疑点（?） 时间分配 (分钟) 提问/举例/教具 复习 5 提问 第三节 检识方法 25 举例 一、沉淀反应 * 二、显色反应 三、色谱检识 第四节 提取与分离方法 一、提取方法 * 30 举例 1、水或酸水提取法 2、醇类溶剂提取法 3、亲脂性有机溶剂提取 二、分离方法 1、总生物碱的初步分离 25 2、生物碱单体的分离 * 举例 小结 5 讨论、思考题、作业： 1、常用生物碱沉淀试剂有哪些？哪些化学成分干扰生物碱沉淀反应？进行沉淀反应有哪些注意事项？ 2、如何应用离子交换树脂提取分离生物碱？ 3、生物碱单体的分离有哪些？其原理是什么？ 4、生物碱的提取分离方法有哪些？ 参考书目： 李端 主编.中药化学.第1版.（全国中医药高职高专卫生部规划教材）北京：人民卫生出版社，2006 吴剑峰 主编. 天然药物化学. 第1版. 北京：人民卫生出版社，2006 漳州卫生职业学院教案 课程名称： 中药化学 编号：3 漳州卫生职业学院教案纸 第 10 页 （三）两性生物碱 具有酚羟基、羧基、内酯或内酰胺结构的生物碱类。 五、沉淀反应 生物碱在酸水中（苦味酸除外）或稀醇中与某些试剂生成难溶于水的复盐或配合物的反应，称为生物碱的沉淀反应。与生物碱形成沉淀的化学试剂称为生物碱沉淀试剂。利用该反应可预测中药是否存在生物碱；也可用于提取与分离。 生物碱沉淀试剂根据生成物不同可分成三种类型： 1、生成不溶性盐类：如硅钨酸试剂、苦味酸试剂、磷钼酸试剂等； 2、生成疏松的配合物：如碘-碘化钾试剂； 3、生成不溶性加成物：如碘化铋钾、碘化汞钾等一些重金属盐类。 详见课本表3-1 常用的生物碱沉淀试剂 注意点： 4、反应会出现假阳性现象。 假阳性现象一般出现在水溶液中，主要受到一些水溶液性杂质的干扰，如中药酸水提取液中的蛋白质、氨基酸、多肽、鞣质等。 消除方法：可先在酸水液中加碱碱化后用氯仿萃取出生物碱，使生物碱一蛋白质等水溶性杂质分离；在氯仿萃取液中再加酸水萃取出生物碱，然后再进行生物碱沉淀反应；也可采取薄层色谱或纸色谱方法。 5、由于生物碱对各种沉淀试剂灵敏度不同，所以通常彩三种以上试剂进行检测。 六、显色反应 生物碱可与生物碱显色试剂反应生成不同的颜色，可用于生物碱 漳州卫生职业学院教案纸 第 11 页 的检识和区别个别生物碱。 常用的显色剂与现象见表3-2 常用的生物碱显色反应 七、色谱检识 薄层色谱 吸附剂：硅胶、氧化铝 展开剂：以苯、氯仿为主 因硅胶为弱酸性，因此需加碱处理： 1、在湿法铺板时加一定量的NaOH溶液，使板呈碱性。 2、在中性展开剂中加入一定量的二乙胺或氨水（如氯仿-二乙胺9﹕5或9﹕1） 3、在层析槽中放一盛有氨水的小杯。 漳州卫生职业学院教案纸 第 12 页 第三节 提取与分离方法 一、提取方法 生物碱在生物体内存在形式多样，在提取时，应考虑生物碱的性质和存在形式，选择适宜的提取溶剂和方法。除个别具有挥发性或升华性的生物碱（如麻黄碱）可用水蒸气蒸馏法提取外，大多数用溶剂提取法。 （一）溶剂法 1、水或酸水提取法 （1）适用范围：一般用水溶性生物碱及生物碱盐的提取。 （2）提取法：浸渍法、渗漉法。 （3）优缺点：操作简便、成本低；但体积大、浓缩困难、易霉变、水溶性杂质多，分离困难。 酸水提取液可以采用下列方法进一步处理： （1）阳离子树脂交换法 生物碱的酸水提取液通过离子交换树脂。生物碱盐以阳离子的形式交换到树脂上，而中性、酸性杂质（如糖类、有机酸）不被交换，可随溶液流出树脂柱，从而达到分离的效果。交换完后可用氨水或用稀酸水溶液进行洗脱，可分别得到游离生物碱或生物碱盐。 优缺点：可分离出碱性大小不同的生物碱，纯度高，溶剂用量少，树脂亦可反复使用；但易受金属离子等阳离子型化合物、氨基酸和蛋 漳州卫生职业学院教案纸 第 13页 白质等两性化合物的干扰。 （2）萃取法 将酸水提取液碱化，生物碱盐转变为游离生物碱而析出，可直接滤得。或用氯