药物对豚鼠离体肠平滑肌的作用及PA2PD2测定的实验方案.doc

中药学院综合设计性实验方案 学生学号、姓名： 2006038068 苏鹤桂 2006038071 谭柏森 2006038102钟润桃 2006038062 彭冠 2006038075 王衍栋 年级、专业： 06药学 实验课程名称：药物对豚鼠离体肠平滑肌的作用及PA2、PD2测定 实验分组号： 填写日期： 09.11.11. 实验名称 药物对豚鼠离体肠平滑肌的作用及PA2、PD2测定 项目背景（实验的目的、意义，以及欲解决的问题和国内外研究现状） 实验的目的 建立豚鼠离体肠平滑肌实验模型； 观察阿托品对乙酰胆碱的竞争性拮抗作用 掌握pA2、pD2值的测定方法 实验意义 1 建立方法研究药物拮抗作用 2掌握pA2、pD2值的测定方法 国内外研究现状分析 （一）阿托品对胃肠道的研究状况 阿托品可以抑制受体节后胆碱能神经支配的平滑肌与腺体活动，并根据本品剂量大小，有刺激或抑制中枢神经系统作用。解毒系在M-胆碱受体部位拮抗胆碱酯酶抑制剂的作用, 如增加气管、肠道系粘液腺与唾液腺的分泌，肠道平滑肌挛缩，以及植物神经节受刺激后的亢进。此外，阿托品能兴奋或抑制中枢神经系统，具有一定的剂量依赖性。对心脏、肠和肠道平滑肌作用比其他颠茄生物碱更强而持久。ACh可明显兴奋胃肠道，使其收缩幅度、张力增加，胃、肠平滑肌蠕动增加，并可促进胃、肠分泌，导致恶心、嗳气、呕吐、腹痛及排便等症状。Ah还可使泪腺、气管和肠道腺体、唾液腺、消化道腺体和汗腺分泌增加，使肠道收缩，颈动脉和主动脉体化学受体兴奋。当ACh局部滴眼时，可致瞳孔收缩，调节于近视。ACh尚可作用于自主神经节和骨骼肌的神经肌肉接头的胆碱受体，引起交感、副交感神经节兴奋，肌肉收缩。由于ACh不易进入中枢，故尽管中枢神经系统有胆碱受体存在，但外周给药很少产生中枢作用。M3受体与GQ家族的G蛋白耦联，导致磷脂酶C活化、磷酸肌醇水解，促使三磷酸肌醇和1,2-二酰基甘油水平增高，从而引起钙离子动员，即肌浆网内储存钙离子释放，胞浆内钙离子增多，触发平滑肌收缩。DG水平的增高可激活蛋白激酶C，而使其发生重分布至胞膜，产生磷酸化功能。在大多数情况下，M1,M3,M5亚型的磷酸肌醇反应对PTX不敏感。而M2亚型与GI家族的G蛋白相互作用，介导PTX 敏感性的针对CAMP聚集的抑制反应。M2,M4受体也可通过直接耦联GI,GO蛋白来介导内向整流钾通道的激活和神经元钙通道的抑制，这些离子反应也表现为PTX敏感性。 2) M受体在小肠的分布和介导作用 1986 年CHOO等采用放射配体法发现M2受体在回肠分布的高度优势倾向。此后，许多实验表明在小肠全层组织中均存在M2,M3受体，其中M2受体比例占多数，M3受体数量大约仅占M2受体1/4。比如，MICHEL等用［3H］-联苯乙酰氧基甲基六氢吡啶 (M3配体）选择性标记豚鼠回肠纵肌层内的M3受体，发现M3受体密度较低。在豚鼠、大鼠、狗和人的在体、离体及单个平滑肌细胞众多实验中均发现，M3受体是调节小肠平滑肌收缩的主要受体。有实验表明， M3受体特异性拮抗剂等对兔和豚鼠回肠的亲和力与M3受体的活化一致。另外，选择性M 受体烷基化和脱敏实验也表明，M3受体在标准条件下介导回肠收缩，包括纵肌层和环肌层。也有实验证实，M3受体是调节狗小肠移行性运动复合波的主要受体。这些实验的对象大多是全层平滑肌，而有人提出环肌和纵肌的收缩机制可能不一样。SHI等在分别分析狗小肠环肌和纵肌实验后发现，虽然M3受体是调节环肌收缩的主要受体，但M2,M3均参与纵肌的收缩，因为M2受体拮抗剂在离体或在体实验中用较低浓度即可显著抑制纵肌收缩，而对环肌无明显影响。 二、实施方案（包括实验的原理或技术路线、实验器材与药品、具体操作过程、每个成员的具体分工、实验的进程安排等） 实验原理 1、? （1）.激动药(agonist)：与受体有亲和力又有内在活性药物。 完全激动药(full agonist): α= 1 部分激动药(partial agonist, mixed agonist): 与受体有亲和力，但内在活性较弱 （α1）的药物。 （2）.拮抗药(antagonist)：与受体有亲和力，而无内在活性的药物（α= 0）。 竞争性拮抗药(competitive antagonist)与激动药竞争同一受体的拮抗药。激动药的量效反应曲线可以被竞争性拮抗药平行右移。 非竞争性拮抗药（noncompetitive antagonist）与激动剂作用于同一受体，结合牢固，分解慢或是不可逆的，或作用于相互关联的不同受体。 2、PA2、PD2值 PA2是一种用以表示竞争性拮抗剂作用强度的指标，其