药物有效期的测定.doc

药物有效期的测定 一、目的 1. 了解药物水解反应的特征： 2. 掌握硫酸链霉素水解反应速度常数测定方法，并求出硫酸链霉素水溶液的有效期。 二、原理 链霉素是由放线菌属的灰色链丝菌产生的抗菌素，硫酸链霉素分子中的三个碱性中心与硫酸成的盐，分子式为：（C21H39N7O12）23H2SO4 ，它在临床上用于治疗各种结核病，本实验是通过比色分析方法测定硫酸链霉素水溶液的有效期。硫酸链霉素水溶液在H4.0——4.5时最为稳定，在过碱性条件下易水解失效，在碱性条件下水解生成麦芽酚（α-甲基-β-羟基-γ-吡喃酮），反应如下：（C21H39N7O12）23H2SO4 + H2O ----- 麦芽酚 + 硫酸链霉素其他降解物 该反应为假一级反应，其反应速度服从反应的动力学方程 lg(C0-x)=k/-2.303t + lgC0 式中C0——硫酸链霉素水溶液的初浓度 ——t时刻链霉素水解掉的浓度 t——时间，以分为单位 k——水解反应速度常数 若以lg(C0-x)对t作图应为直线，由直线的斜率可求出反应速度常数k。 硫酸链霉素在碱性条件下水解得麦芽酚，而麦芽酚在酸性条件下与三价铁离子作用生成稳定的紫红色鳌合物，故可用比色分析的方法进行测定。 由于硫酸链霉素水溶液的初始C0正比于全部水解后产生的麦芽酚的浓度，也正比于全部水解测得的消光值E∞,即C0E∞；在任意时刻t，硫酸链霉菌素水解掉的浓度应该时刻测得的消光值Et成正比，即 Et，将上述关系代入到速度方程中得：lg(E∞—Et) = （-k/2.303）t + lgE∞ 可见通过测定不同时刻t的消光值Et，可以研究硫酸链霉素水溶液的水解反应规律，以lg(E∞—Et)对t作图得一直线，由直线斜率求出反应的速度常数k。 药物的有效期一般是指当药物分解掉原含量的10%时所需要的时间t0.9。 t0.9。=ln(100/90)/k= 1/k·ln(100/90) = 0.105/k 三、 仪器药品 722或752型分光光度计 1台 超级恒温槽 1台 磨口锥形瓶100ml 2个 移液管 20ml 1支 磨口锥形瓶50ml 11个 吸量管 5ml 3支 量筒50ml 1个吸量管 1ml 1支 水浴锅 1个 秒表 1只 0.4 %硫酸链霉素溶液 1.12~1.18mol/L硫酸溶液 2.0mol/L氢氧化钠溶液 0.5 % 铁试剂 四 、 实验步骤 1. 调整超级恒温槽的温度为 40。 2. 用量筒50ml约0.4%的硫酸链霉素溶液置于100ml的磨口瓶中，并将锥形瓶放于40的恒温槽中，用刻度吸量管吸取2.0mol/L的氢氧化钠溶液0.5ml,迅速加入硫酸链霉素溶液中，当碱量加入至一半时，打开秒表，开始记录时间。 3. 取5个干燥的50ml磨口锥形瓶，编好号，分别用移液管准确加入20ml0.5 mol/L 0.5 %铁试剂，再加入5滴1.12～1.18mol/L硫酸溶液，每隔10分钟，准确取反应液5ml于上述锥形瓶中，摇匀呈紫红色，放置5分钟，而后再波长为520nm下用722型分光光度计测定消光值Et，记录实验数据。 4. 最后将剩余反应液放入沸水浴中10分钟，然后放至室温再吸收2.5ml反应液于干燥的50ml磨口锥形瓶中，另外加入2.5ml蒸馏水，再加入20ml0.5 %铁试剂和5滴硫酸溶液，摇匀至紫红色，测其消光值乘2后即为全部水解时的消光值 E∞。 5. 调节恒温槽，升温至50，按上述操作每隔5分钟取样分析一次，共测5次为止，记录实验数据。 6. 实验记录 温度 40氢氧化钠溶液0.02mol/L t（分）10 20 30 40 50 Et 0.010 0.010 0.010 0.011 0.014 0.009 0.011 0.011 0.011 0.012 Et平均 0.010 0.010 0.010 0.011 0.013 温度 0℃ 氢氧化钠溶液mol/L E∞=0.364 t（分）10 20 30 40 50 Et 0.006 0.030 0.042 0.061 0.077 0.005 0.029 0.043 0.060 0.078 Et平均 0.006 0.030 0.042 0.060 0.078 E∞—Et 0.358 0.334 0.322 0.304 0.286 lg(E∞—Et) -0.446 -0.476 -0.492 -0.517 -0.544 温度 50氢氧化钠溶液mol/L E∞=0.364 t（分）0 15 20 25 Et 0.009 0.040 0.060 0.091 0.133 0.010 0.04