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河南农业科学, 2011, 0( 1) : 1361 0
Journal of Henan Agricultural Sciences
PRRSV ORF7
1, 2 2 2 2 2 2
刘 明 , 张改平, 肖治军 , 郭军庆 , 乔松林 , 王 丽,
2 1,2 1,2 1*
史西保, 刘运超 , 游雷鸣 , 王爱萍
( 1. , 50001; 2. ,
/ , 50002)
: 从猪繁殖与呼吸综合症病毒( PRRSV) 河南分离株( HN07 1HN072) 的细胞培养物中提取
RNA, 根据参考株IAFexp91 N 蛋 基因序列设计出2 对引物, 成功克隆出OR F7 全长基因, 并连
接至pMD19T 载体基因测序结果表明, 2 株PRRSV 河南分离株 OR F7 基因序列完全相同; 该
序列与HB ( hs) 同源性为100% , 与标准美洲株VR2332 和我国早期分离的BJ 株同源性为93.
8% 将该基因亚克隆到原核表达载体 pGEX6p1 后, 转化大肠杆菌BL21, IPTG 诱导表达并对
表达条件进行优化SDSPAGE 和Westernblot 结果表明, 成功表达了约 0 kD 的融合蛋 ; 使
用 1. 0 mmol/ L 的IPTG 在2YT 培养基中诱导8h 可获得最大表达量
: 猪繁殖与呼吸综合征; 反转录; 克隆; 表达; W esternblot; 美洲型
: S852. 65 : A : 100 3268( 2011)
Cloning and Prokaryotic Expression of the OR F7 Gene of
PRRSV Henan Strain
1, 2 2 2 2 2 2
LIU Ming , ZHANG Gaiping , XIAO Zhijun , GU O Junqing , QIAO Songlin , WANG Li ,
2 1, 2 1, 2 1*
SHI Xibao , LIU Yunchao , YOU Leiming , WAN G Aiping
( 1. Department of Bioengineering, Zhengzhou University , Zhengzhou 50001, China;
2. Key Laborat ory of Animal Immunology of the M inistry of Agriculture/ Henan Provincial Key Laboratory of
Animal Immunology , H enan Academy of Agricultural Sciences, Zhengzhou 50002, China)
Abstract: T otal RNA w as extracted from the cell cultures of tw o H enan strains of porcine repro
ductive and respiration syndrome virus ( PRRSV ) , HN071 and HN072, and the OR F7 gene of
PRRSV w as amplified by
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