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20110101325程雪峰三种方法提取猪苓菌核基因组的比较
三种提取猪苓菌核基因组方法的比较
学 院： 农 学 院
专 业： 植物检疫
年 级： 2011级
姓 名： 程雪峰
指导教师： 胡春艳
职 称： 讲 师
二〇一五年五月
学士学位论文
三种提取猪苓菌核基因组方法的比较
摘要：通过3种方法提取山西和顺猪苓菌核DNA的比较，即试剂盒Omega Fungal DNA D3390-01提取法、CTAB法、改良的CTAB法，结果表明只有试剂盒法提取出了猪苓菌核DNA，而且方法简便，效率很好,但有一定降解。用试剂盒法所提取的猪苓菌核DNA作为模板，进行PCR扩增，得到了清晰的扩增条带，可用于PCR等后续实验。
关键字：猪苓菌核；DNA提取；试剂盒法；CTAB法；PCR
Comparison of three extraction methods Polyporus sclerotium genome
Abstract: Comparing the extracted DNA Shanxi Heshun Polyporus sclerotium by three methods, The kit Omega Fungal DNA D3390-01 extraction, CTAB method, extraction method modified CTAB method, tThe results showed that only kit out Polyporus sclerotia extracted DNA, and the method is simple, good efficiency, but there is a certain degradation. Kit method Polyporus sclerotia extracted DNA as a template for PCR amplification to obtain a clear amplification bands, can be used for PCR and other follow-up experiments..
Key words: sclerotia of Polyporus umbellatus; DNA extraction ;?The kit Omega?D3390-01?Fungal?DNA; CTAB method; PCR
1 前言 1
1.1猪苓 1
1.2菌核 1
1.3猪苓的生长条件 1
1.4猪苓的形态学分类 1
1.4.1猪苓的经典分类学分类 1
1.4.2猪苓的现代分类学研究 1
1.5提取真菌基因组的方法 2
2.1材料 2
2.1.1供试菌种 2
2.1.2实验仪器 2
2.1.3实验试剂 2
2.1.3.1试剂盒法所用试剂 2
2.1.3.2 CTAB法所用试剂 2
2.1.3.1 CTAB改良法所需试剂 2
2.2实验方法 2
2.2.1试剂盒法提取DNA 2
2.2.1.1实验准备 2
2.2.1.2提取方法 3
2.2.2 CTAB法 3
2.2.2.1 CTAB法试剂的配置 3
2.2.2.2实验准备 4
2.2.2.3实验步骤 4
2.2.3 CTAB改良法 4
2.2.3.1 CTAB改良法试剂的配置 4
2.2.3.2实验准备 5
2.2.3.3实验步骤 5
2.3 结果测定 6
2.3.1琼脂糖核算凝胶电泳 6
2.3.1.1实验材料 6
2.3.1.2实验仪器 6
2.3.1.3实验溶液及配置 6
2.3.1.4实验步骤 6
2.3.2 PCR扩增 6
2.3.2.1实验材料 6
2.3.2.2实验仪器 6
2.3.2.3实验试剂 6
2.3.2.4实验步骤 6
3.1三种方法提取出基因组结果见图1-A、B、C 7
3.2 PCR扩增后的结果见图2 8
4结论与讨论 9
参考文献 11
致谢 12
1 前言
1.1猪苓
猪苓，是真菌门Eumycophyta、担子菌纲Busidiomyceres、多孔菌目Polyporales、多孔菌科Polyporaceae、猪苓属Grifola、学名是Grifola umbellatus[1]。它在我国中医药领域有着很强的药用价值，据研究表明猪苓可以促进肾排泄K+ 、Na+ 、C l- , 而抑制C a2+ 排泄和抑制尿草酸钙的生长与凝聚的作用, 同时表现出明显的利尿和抑制结石形成的能力，并可保护肾功能。猪苓可应用
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