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摘要
SEPT4,TEKT4基因与特发性弱精子症关系的研究
研究生:冯晓霞
导师:李玉山
专业:I临床检验诊断学
郑州大学第三临床学院
河南 郑州450052
摘要
背景与目的
近几十年,全世界范围内育龄男性的精液质量都存在着下降趋势,男性不
育已是全世界面临的重要问题,而男性精液质量的下降主要体现在指标精子活
动力低下。精子活力是指精子的前向运动能力,它是精子穿透宫颈粘液,到达
受精部位,穿透放射冠和透明带,进入卵细胞的胞浆,完成受精全过程的重要
Health
条件。世界卫生组织(World
成男性低生育力和不育的主要原因之一。据报道【1l,大约24%的低生育力男性是
由于AZS引起的,另外55%的低生育力男性患者合并精液异常、精子活力低下、
精子形态异常。引起弱精子症的机制也很复杂,主要涉及精子能量代谢的异常、
信号传导通路的异常以及精子运动结构的异常等。
由于精子的运动主要是靠精子鞭毛的摆动实现的,因此分析精子鞭毛的结
构特征并探讨弱精子症的病因及其发生机制,为低生育男性提供有效合理的临
床治疗策略尤为重要。精子鞭毛是精子的主要组成部分之一,主要由轴丝、外周
致密纤维(outerdensefibers,ODFs)和线粒体鞘(mitochondrialsheath,MS)
等组成。目前研究发现,大约有250多种精子鞭毛轴丝及其附属结构的基因参
与精子运动这一生理过程,它们的突变或表达异常均可引起精子鞭毛结构和功
能的紊乱,导致精子运动障碍和活力低下12引。
摘要
为更深入地了解AZS的发生机制,本研究采用逆转录.多聚酶链式反应
TEKT4与特发性弱精子症发生机制的关系,从而为临床对特发性弱精子症的可
行性诊断和治疗提供可靠的实验基础和理论依据。
材料与方法
1研究对象
月河南省人类精子库合格的供精志愿者,精子密度60x106/ml,精子活力(a+b)
级≥60%;32份特发性弱精子症患者(年龄20-38岁)精液标本来自于同期郑州
大学第三附属医院生殖医学中心男科门诊的患者,精子密度20x106/ml,精子活
力(a+b)级50%,分别组成为正常男性组和弱精子症组。
2方法
2.1 RT.PCR
采用RT.PCR方法,检测SEPT4mRNA和TEKT4mRNA在两组精子中的表
达。
2.2 Western印迹
、I
达o
2.3免疫细胞化学
采用免疫细胞化学技术,检测SEPT4蛋自在两组精子中的定位及表达。
3统计处理
采用SPSSl7.0软件进行统计学分析,数据以xxs表示。弱精子症组和正常
男性组SEPT4、TEKT4表达之间的比较采用两独立样本f.检验进行分析;检验
水准a=0.05。
ll
摘要
结果
1 两组研究对象精子中SEPT4蛋白的定位与表达
SEPT4蛋白在精子中定位于精子鞭毛的环结构,并且与正常男性组相比,
特发性弱精子症患者精子中SEPT4蛋白表达量的差异具有显著意义(f=3.452,
P=0.001)。
mRNA的表达
2两组研究对象精子中SEPT4
mRNA表达量与正常男性组相比显著降低,差异
弱精子症组精子中SEPT4
具有显著意义(f=3.521,P=0.001)。
3两组研究对象精子中SEPT4蛋白的表达
弱精子症组精子中SEPT4蛋白的表达水平与正常男性组相比显著降低,差
异具有显著意义(t--5.872,P=0.001)。
mRNA的表达
4两组研究对象精子中TEKT4
TEKT4
mRNA在弱精子症组精子中的表达量与正常男性组相比显著降低
(f=4.325,P=
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