免疫炎性反应和帕金森病关系研析.pdf

中文摘要 免疫炎性反应与帕金森病关系的研究 摘 要 目的：帕金森病(ParkinsonDisease，PD)是一种多发 于中老年人的神经系统变性疾病，是黑质内多巴胺(DA) 能神经元大量减少，使纹状体中的神经递质DA和乙酰胆碱 之间的相互拮抗作用失调，而导致的神经系统疾病。临床上 以进行性加重的运动缓慢、肌强直、静止性震颤、姿势步态 异常等为特征。PD患者黑质DA能神经元大量减少的机制 目前尚不清楚，但普遍认为与多种因素参与有关，近年来， 诸多研究显示小胶质细胞参与的炎症反应与PD关系密切。 小胶质细胞激活能释放肿瘤坏死因子一alpha(TNF．晓)等多种 细胞毒性物质促发DA能神经元变性。PD患者的脑和脑脊 液TNF．c【升高已得到普遍证实，但作为联系神经系统和全身 其它部分的重要媒介，血液在PD发生发展中的作用却仍很 障碍者增高，而症状控制者浓度正常，表明TNF．cc的分泌与 外周血单核细胞分泌的IL．6、TNF—a也比对照组增高。PD患 者外周血单核细胞培养，检测上清液，结果IL．1a、IL．1p、 IL．2、IL．6和TNF．c【明显低于正常对照。研究结果有所不 同，可能与口服左旋多巴(L—dopa)等药物治疗有关。有研究 激活，释放致炎因子(TNF．c【、IL．16等)和细胞毒性因子(NO、 活性氧ROS等)导致DA能神经元变性，因此常用来模拟机 中文摘要 体感染和免疫激发状态。国内外已有多人采用LPS黑质注射 诱导的PD模型进行研究，但DA能神经元的毁损情况不甚 一致，而且目前尚不清楚外周血TNF．c【的变化究竟如何，它 能否反映黑质DA能神经元毁损的情况。本研究旨在通过于 大鼠黑质内立体定向注射LPS造成一炎症环境，研究黑质 DA能神经元的毁损情况及血清TNF．c【与黑质DA能神经元 变性之间的关系，加深对PD的免疫机制的了解，以期为PD 的治疗提供新的思路。 24h、 方法：将30只健康雌性SD大鼠随机分为4组， 14d、28d三个组各8只，利用立体定位仪向大鼠右侧的黑质 致密部注射2／al 只，于黑质内定位注射PBS。除24h组外，各组大鼠自术后 7天起行悬空摆动试验及其他异常行为观察。在相应时间点， 深度麻醉后，自右心耳取血，灌注、固定、包蜡、切片。免 疫组化染色观察DA合成限速酶酪氨酸羟化酶 间的变化情况。用放射免疫法(RIA)测定各组大鼠血清 TNF一0【水平，分析其与黑质TH阳性神经元损伤的相关性。 结果采用SPSSll．5统计软件处理，所有计量资料采用均数 ±标准差表示，统计学方法采用两样本比较的t检验、配对 t检验、单因素方差分析、q检验和直线相关分析。 结果：术后l周部分大鼠即开始出现弓背、震颤、活动 迟缓、少动、嗅探、尾僵直、竖毛、频繁洁毛、后肢站立等 异常行为，少数大鼠出现自发性左向旋转行为。14d、28d组 的16只鼠中共有14只向左侧摆动的次数／两侧总次数的百分 比≥70％视为成功模型。24h时即观察到右侧黑质TH阳性 中文摘要 神经元较左侧减少，右侧占左侧的百分比(存留率)为 66．0-a：4．8％，差异有显著性(P0．001)，随着时间的延长， 的存留率，24h、14d、28d三个组间无显著性差异，同时该 三组左侧的黑质也有不同程度的神经元损伤。24h、14d、28d fmol／ml， 之间无显著性差异(P0．05)。相关性分析显示LPS组大鼠 的黑质TH阳性细胞的存留率与其血清TNF．0【水平之间存在 负直线相关关系(P0．01)。 结论：本研究以LPS作为诱导剂，摸索了LPS诱导的 PD的早期动物模型，采用免疫组化和ⅪA技术研究了PD 与免疫炎性反应之间的关系。研究证实：1．黑质立体定向注 射LPS，可以诱导出类似PD早期的动物模型，为研究PD 与炎性反应的关系奠定基础；2．炎症导致的TH阳性神经元 变性呈时间依赖性，但PD的发病过程中炎症过程的破坏作 用只是阶段性的，长期的抗炎治疗也许并不明智；3．一侧黑 质受损或炎症反应可能进一步导致双侧的TH阳性神经元 及DA含量减