MicroRNA结合位点单核苷酸多态性和原发性肝癌发生及预后的关系.pdf

目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………4 研究论文MicroRNA结合位点单核苷酸多态性与原发性肝癌发生及 其预后的关系 前言……………………………………………………………………···7月U舌“一”“”一”“”“””“一”””””一”“一””一…一”““……”““”一“。， 材料与方法………………………………………………………………9 结果……·········…····…·…····…·…···…············…·一··············16 附l羽······…······················…············…···…·····……··········-·19 附表……………………………………………………………………23 讨{念···…················…·······…····························…·“···“····29 结论……·········…··…·······……···……···········……一“一一”·…“32 参考文献………………………………………………………………33 综述 MicroRNA与原发性肝癌相关研究进展…………………………36 致 谢····················…······…··…·······…·······························44 个人简历……………………………………………………………………45 中文摘要 MicroRNA结合位点单核苷酸多态性与原发性肝癌 发生及其预后的关系 摘 要 酸组成，其由染色体DNA编码，在转录后水平发挥调控基因表达的功能。 越来越多的研究发现，miRNA具有调节胚胎发育、细胞增殖、分化、凋 译区)完全或不完全的碱基互补结合，以实现其负性调节靶mRNA的功能， 与人类肿瘤发生关系密切，但关于miRNA结合位点SNP与原发性肝癌关系 的研究甚少。本研究拟通过对与肿瘤密切相关的miRNA结合位点SNP进行 测序分析，并随访相应原发性肝癌患者，进行生存分析，结合病例一对照 研究，鉴定出与肝癌发生及预后相关的特异SNP位点，对分析探讨个体和 肿瘤易感因素的关系，筛查易患肝癌的高危人群，以及进行预后的评价， 建立有效的预警机制均具有重要意义。 方法： 科大学第四医院肝胆外科住院的手术患者，经实验室及影像学等检查，临 床诊断为原发性肝癌，行原发性肝癌根治手术，所有患者皆经术后病理明 确诊断为肝细胞癌，肝癌组60例原发性肝细胞肝癌的标本，均取白手术 年4月间，在河北医科大学第四医院采集的正常人静脉血样。 2基因组DNA提取：用DNA纯化试剂盒提取组织及血标本的基因 组DNA，提取后置于4C恒温冰箱中保存备用。 3 chain PCR(polymerase 经琼脂糖凝胶电泳证实后，送往上海生物工程技术服务有限公司测序。 4随访：通过电话随访原发性肝癌患者术后的生存情况。 中文摘要 5统计分析：采用t检验比较计量资料，用f检验分析肝癌组与对 计生存函数曲线，用Log．Rank方法对各组生存曲线分布的异同进行检验， 比较生存率有无差别。 义。 增并测序，发现rsl2583、rsl rsl0463六个多态性位点，低频率等位基因出现率极小，测序结果显示其 rsl6917496、rsl053667、rsl 究。 1 对与miRNA在基因上结合的6个位点的SNP分布频率分析显示， 在肝癌组和对照组之间，rsl6917496、rsl053667、rsl 性位点各组间比较，发现此四个位点SNP分布频率无明显差异。而对于 1337、 rs3660五个多态位点，各基因型患者组间生存率无明显差别。而对于 型患者两组间生存率有差别俨O