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课题13 生物实验的方法 1.差速离心法:利用高速离心机不同的离心速度产生的离心力,将各部分分开。 2.荧光染料标记法:如用绿色和红色荧光的染料分别标记两种细胞表面的蛋白质分子,进行细胞融合实验。 3.同位素标记法(元素示踪法):是指利用放射性元素作为示踪剂对研究对象进行标记的微量分析方法,研究细胞内的元素或化合物的来源、组成、分布和去向等,进而了解细胞的结构和功能、化学物质的变化、反应机理等。用于示踪技术的放射性同位素一般是用于构成细胞化合物的重要元素。如3H、14C、15N、18O、32P、35S等。如“研究分泌蛋白的合成与分泌”、“噬菌体侵染细菌的实验”、“DNA分子的半保留复制”等。 4.杂交法:如动植物的杂交、自交、测交实验等。 5.化学分析法:如“番茄对Ca和Si的选择性吸收”、“叶绿体中色素的提取和分离”等。 6.模拟实验法:如“渗透作用的实验装置”、“细胞大小与物质运输的关系”等。 7.统计调查法:如“遗传病调查”和“种群密度调查”,其中“种群密度调查”所用的具体方法有样方法和标志重捕法。 8.实验结果的显示方法——实验现象的观测指标 (1)光合作用:O2释放量或CO2吸收量或有机物生成量。例:水生植物可依气泡的产生量或产生速率;离体叶片若事先沉入水底可依单位时间内上浮的叶片数目;植物体上的叶片可依指示剂(如碘液)处理后叶片颜色深浅。 (2)呼吸作用:O2吸收量或CO2释放量或有机物消耗量,有色液滴的移动情况等。 (3)细胞液浓度大小或植物细胞活性:质壁分离与复原。 (4)溶液浓度的大小:U型管+半透膜。 (5)甲状腺激素的作用:动物耗氧量、发育速度等。 (6)生长激素的作用:生长速度(体重、体长变化)。 (7)胰岛素的作用:动物活动状态(是否出现低血糖症状——昏迷)。 (8)生长素作用及浓度高低的显示:可通过去除胚芽鞘后补充生长素后的胚芽生长情况来判断(弯曲、高度)。 (9)CO2:Ca(OH)2溶液(澄清石灰水变浑浊)。 (10)还原性糖:斐林试剂(沸水浴后生成砖红色沉淀)。 (11)蛋白质:双缩脲试剂(紫色)。 (12)脂肪:苏丹Ⅲ染液(橘黄色);苏丹Ⅳ染液(红色)。 (13)淀粉:碘液(变蓝色)。 (14)DNA:甲基绿试剂(染色后呈绿色)。 (15)RNA:吡罗红试剂(呈红色)。 9.实验条件的控制方法 (1)增加水中氧气——泵入空气或吹气或放入绿色植物 (2)减少水中氧气——容器密封或油膜覆盖或用凉开水 (3)除去CO2——NaOH溶液或澄清石灰水 (4)除去叶中原有淀粉——置于黑暗环境 (5)除去叶中叶绿素——酒精加热 (6)除去光合作用对呼吸的干扰——给植株遮光 (7)如何得到单色光——棱镜色散或薄膜滤光 (8)血液抗凝——加入柠檬酸钠 (9)线粒体提取——细胞匀浆离心 (2010·盐城调研)下列关于实验的叙述正确的一组是( ) A.用3H标记的胞嘧啶核糖核苷酸研究DNA的复制 B.可用玻璃纸制成的透析袋模拟生物膜的透性 C.通过能否产生二氧化碳来探究酵母菌的呼吸方式 D.通过纸层析法可提取叶绿体中的四种色素 【解析】 用3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸研究DNA复制。酵母菌的有氧呼吸和无氧呼吸都能产生二氧化碳,不能以能否产生二氧化碳来探究酵母菌的呼吸方式。提取叶绿体中的四种色素的方法是用酒精溶解色素。 【答案】 B (2010·东北师大附中检测)在下列科学研究的过程中,采用的技术手段相似的一组是( ) ①证明光合作用的过程中释放的氧气来自于水 ②研究分泌蛋白合成、运输和分泌的过程 ③肺炎双球菌转化实验 ④T2噬菌体侵染细菌的实验证明DNA是遗传物质 A.①②③④ B.①②③ C.②③④ D.①②④ 【解析】 证明光合作用的过程中释放的氧气来自于水,研究分泌蛋白合成、运输和分泌的过程,T2噬菌体侵染细菌的实验证明DNA是遗传物质都采用了同位素标记法。 【答案】 D 1.(2010·广州调研)科学研究发现,在体外一定条件下培养造血干细胞,它可以分裂、分化形成神经细胞。下列有关叙述中,不正确的是( ) A.分化发生在生物体的整个生命进程中 B.分化过程中遗传物质发生了改变 C.只有离体培养的细胞才能表现出全能性 D.不同血细胞的形成是遗传信息执行情况不同的结果 【解析】 细胞分化过程中遗传物质没有发生改变,只是基因进行了选择性表达。 【答案】 B 2.下列有关细胞生命历程的叙述,正确的是( ) A.细胞内酶活性升高是衰老细胞的主要特征 B.基因的选择性表达是细胞分化的主要原因 C.细胞凋亡是指由不利因素引起的细胞损伤和死亡 D.无丝分裂是真核生物进行细胞分裂的主要方式 【解析】 衰老细胞的酶活性降低。细胞凋亡是指由遗传物质决定的细胞自然死亡。有丝分裂是真核生物进行细胞分裂
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