1.1DNA重组技术的基本工具学案.doc

课题１.１ DNA重组技术的基本工具 一、学习目标 1．简述基因工程的概念。 2．简述DNA重组技术所需三种基本工具的作用。 3．运用所学DNA重组技术的知识模拟制作重组DNA模型 二、重点难点 1．重点 DNA重组技术所需三种基本工具的作用。 2．难点 基因工程载体需要具备的条件。 三、学习过程 （一）基因工程的概念 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 →拼接→ → 结果 思考：基因工程是否改变了基因？ （二）DNA重组技术的基本工具 1．“分子手术刀”——限制酶 思考： ①什么是限制酶？ ②从哪里可以获得限制酶？ ③这种酶有什么作用特点呢？ 小组活动：动手找出纸条中的GAATTC序列，并在G和A之间切开。 思考： ④在切割DNA分子时，限制酶切割几个磷酸二酯键，为什么？ 小组活动：已知SmaⅠ限制酶识别的DNA序列是CCCGGG，切割位点在G和C之间；G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是↓GATC，请你在手中的纸条上分别找出并进行切割。 思考： ⑤切割后的DNA末端有 和 。 ⑥要获得相同的黏性末端，一定要使用同一种限制酶切割吗？ “分子缝合针”——DNA连接酶 阅读教材回答： ①连接黏性末端和平末端所用DNA连接酶有什么不同呢？ ②连接酶怎样实现连接的？ 小组活动：利用胶带、剪刀动手模拟制作重组ＤＮＡ分子 思考：将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoRⅠ酶切，酶切产物用DNA连接酶连接后，由两个DNA片段之间连接形成的产物有 　、 　　　　　 和 　　　　　　 三种。 “分子运输车”——基因进入受体细胞的载体 最常见的载体——质粒需具备以下条件： （1）有多个 ，以供 插入。 （2）有 基因，以供重组DNA的 。 （3）有 能力。 注意：天然质粒 直接做基因工程的载体，必须经过 。 （四）自主练习 1．下图是基因工程主要技术环节的一个基本步骤，这一步需用到的工具是 （ ） A．DNA连接酶和解旋酶 B．DNA聚合酶和限制性核酸内切酶 C．限制性核酸内切酶和DNA连接酶 D．DNA聚合酶和RNA聚合酶 2．依右图有关基因工程的工具酶功能的叙述，不正确的是 （ ） A.切断a处的酶为限制性核酸内切酶 B.连接a处的酶为DNA连接酶 C.切断b处的酶为解旋酶 D.切断b处的酶为限制性核酸内切酶 3． DNA连接酶的作用是 （ ） A. 使质粒和目的基因的黏性末端之间形成氢键 B. 恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 C. 使重组DNA与宿主DNA相连 D. 使单个的脱氧核苷酸连接形成一条链 4． 下列有关质粒的叙述，正确的是 （ ） A．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 B．质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNA分子 C．质粒只有在侵入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制 D．细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行的 5．以下说法正确的是 （ ） A．所有的限制酶都只能识别同一种核苷酸序列 B．质粒是基因工程中唯一的载体 C．运载体必须具备的条件之一是具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D．DNA连接酶与DNA聚合酶都是连接磷酸二酯键的，所以它们的作用是相同的 6．科学家常选用的细菌质粒往往带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用是 ( ) A．提高受体细胞在自然环境中的耐热性 B．有利于检测目的基因否导入受体细胞 C．增加质粒分子的相对分子质量 D．便于与外源基因连接成DNA的过程。 7．限制酶在DNA的任何部位都能将DNA切开吗？以下是四种不同限制酶切割形成的DNA片段： (1) …CTGCA??? (2) …AC??? (3) GC… ??? …G??????????? …TG??????? CG… (4) …G (5) G… (6) …GC