遗传学综合实验_new重点解读.doc

遗传学设计性实验报告 实验名称 果蝇杂交实验 学 院 生命科学学院 专 业 生物技术 班级名称 生技131 学生姓名 林玉 学 号 1314300100 任课教师 汪珍春 完成日期 2015年12月5日前言 实验目的：学会杂交实验设计的方法；初步理解遗传的三大定律；学会运用统计学和遗传学的理论分析实验现象；初步学会论文的撰写方法。 实验原理：遗传的三大定律 实验材料 品种：黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)品系 2# × 6＃ 工具及药品：显微镜、培养瓶、棉塞、量筒、麦片、玉米粉、蔗糖、琼脂粉、丙酸、乙醚等 实验方法 3.1、果蝇的饲养 培养基的配制：70ml水+0.85g琼脂+7g蔗糖→煮开至琼脂溶化→加入麦片糊（30ml冷水与8g麦片混匀）→煮开约3-5分钟，成粘稠的糊状→稍凉后加入1g酵母粉，0.4-0.5ml丙酸，混匀→分装，趁热塞上棉花塞。 生活周期：果蝇的生活周期包括卵、幼虫、蛹和成虫四个完全变态的发育阶段，从初生卵发育至新羽化的成虫为一个完整的发育周期，在25℃，60％相对湿度条件下，大约为10天。 培养条件：25°培养箱中培养。 3.2、果蝇杂交的流程 3.2．1、我（2#♀╳6#♂）和另一组员（2#♂╳6#♀） 3.2.2、杂交前步骤：处女蝇的收集：果蝇雌性生殖器光具有受精囊，可保留交配所得的大量精子，能使大量的卵受精，因此作品系间杂交时，必须选用处女蝇，而雌蝇刚羽化后一般12h之后交配，因此在把培养瓶内的果蝇除去后，8h内所收集到的雌蝇必定为处女蝇。 当需要从亲本取出所需的果蝇材料时，转移至25℃温箱培养，并且当亲本培养瓶中出现第一个蛹后，除去所有成虫或转瓶培养，每隔8h观察一次，此时出现的果蝇进行性别判断，分离出来的雌蝇必然为处女蝇。 3.2.3.杂交准备：①首先每一培养瓶要贴好标签，注明品系、杂交情况、时间、班别及姓名。 ②分别取黑腹果蝇原种2#和6#于两个培养瓶中，并培养7～8d，较多蛹或蛹变黑时除去原种。 ③然后2#培养瓶每隔8h取一次处女蝇，超过8h的雌蝇除去不用，可保留雄蝇，将取出处女雌和雄性果蝇分别放置于两个培养瓶中，直到有6—7对处女蝇和6—7对雄性果蝇。 ④同样地6#培养瓶的取处女蝇和雄性果蝇操作与2#果蝇的取法一致。 3.2.4.杂交步骤：①杂交前确认两个品系的处女蝇内是否混有雄蝇，若有，则重新取处女蝇，同时雄性果蝇内是否混有雌蝇，若有，只需除去雌蝇，雄蝇可用于杂交实验； ②将2#♀与6#♂放入同一个培养瓶中杂交培养，用同样的方法进行2#♂和6# ♀的杂交培养； ③出现第一个蛹后，将亲本除去，之后出现的成虫即为F1代，若想增加F1代数量，将亲本转瓶继续杂交培养。然后统计F1代的性别、性状与数量，记录好各自的品系杂交名称； 实验结果 表6# × 2#果蝇杂交F1实验结果 2#♀×6#♂ 2#♂×6#♀ ♀ ♂ ♀ ♂ 红灰长 合 计 205 166 106 144 结果分析 规定：眼色 W-w 翅型 M-m 体色 根据表1，雌果蝇总共 311，雄果蝇总共310，比例约为1.00 表2 性别比X2检验 雄性 雌性 合计 实际观测数O 310 311 621 理论频数P 1/2 1/2 1 理论数E 310.5 310.5 621 O-E 由表2可得：X2=0 X20.05=3.84， 所以果蝇的性别决定方式为XY型 5.2、眼色分析 规定：眼色 W-w 从实验数据中得，?F1代中，正交中只有红眼出现，但反交既出现了红眼，也出现了白眼，说明红眼为显性性状，白眼为隐性，且出现交叉遗传现象，故推断控制眼色的基因位于X染色体上，红眼基因以XW表示，白眼基因以Xw表示。 假设其遗传过程如图3： 正交：P 2#♀XW XW(红眼)×6#♂XW Y(白眼) 配子： XW XW XW Y F1： XWXW XWXW XWY XWY 雌性红眼1 ： 1雄性红眼 X2检验（仅检验眼色性状分离的情况） 表3 眼色比X2检验 红眼 白眼 合计 实际观测数O 106 144 2